【摘 要】
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海洋沉积物微生物资源丰富,放线菌是其中的优势类群之一,但是海洋放线菌纯培养难度较大.本文利用响应面法对采自印度洋的深海沉积物样品进行湿热处理条件优化,实验中选取了5个因素设计实验,生长的放线菌经纯化培养后,针对16S rRNA基因进行测序分析,以每种优化条件下培养出的放线菌种类数为响应值,优化结果最终为:湿热处理温度55℃,湿热处理时间1.2727 min,风干时间1.6970 d,抑制剂浓度0.9697倍,海盐添加量为2.1212％.最后,重新选择4种培养基,利用优化后的条件进行该样品纯培养分离,分离出
【机 构】
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藏药检测技术教育部工程研究中心,陕西咸阳712082;西藏民族大学西藏高原相关疾病分子遗传机制与干预研究省级重点实验室,陕西咸阳712082
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海洋沉积物微生物资源丰富,放线菌是其中的优势类群之一,但是海洋放线菌纯培养难度较大.本文利用响应面法对采自印度洋的深海沉积物样品进行湿热处理条件优化,实验中选取了5个因素设计实验,生长的放线菌经纯化培养后,针对16S rRNA基因进行测序分析,以每种优化条件下培养出的放线菌种类数为响应值,优化结果最终为:湿热处理温度55℃,湿热处理时间1.2727 min,风干时间1.6970 d,抑制剂浓度0.9697倍,海盐添加量为2.1212％.最后,重新选择4种培养基,利用优化后的条件进行该样品纯培养分离,分离出大量放线菌及部分潜在分类单元.实验证明,多种分离方法的组合和优化可提高环境样品中纯培养微生物多样性及出菌率,有助于获得更多稀有微生物资源.本实验可为纯培养分离中不同培养基成分的组合设计提供方法参考.
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