【摘 要】
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目的 探讨小核糖核蛋白颗粒蛋白SmD3 (small ribonucleoprotein particle protein SmD3,SmD3)表达改变对果蝇Schneider 2(S2)细胞中剪接体成分U2A的影响.方法 通过转染构建敲
【机 构】
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江苏大学附属医院,镇江,212001
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目的 探讨小核糖核蛋白颗粒蛋白SmD3 (small ribonucleoprotein particle protein SmD3,SmD3)表达改变对果蝇Schneider 2(S2)细胞中剪接体成分U2A的影响.方法 通过转染构建敲减SmD3基因的S2细胞及其对照模型,并进行干涉效率验证.构建pUAS-attB-SmD3克隆,通过转染实现SmD3基因在S2细胞中的过表达.采用免疫荧光染色检测各组细胞模型中U2A蛋白的表达水平.通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞模型中U2A mRNA的表达水平.结果 选择干涉效率最优的SmD3 siRNA-1进行实验,与对照组比较,SmD3基因敲减组U2A蛋白及mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义(P均＜0.05).成功构建pUAS-attB-SmD3克隆并在S2细胞中过表达,与对照组比较,SmD3基因过表达组U2A蛋白及mRNA表达水平降低,差异均有统计学意义(P均=0.000).结论 SmD3基因编码的剪接体核心蛋白与U2A可能在果蝇S2细胞中发挥相互拮抗的作用.
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