【摘 要】
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研究人胞红蛋白(Cytoglobin,CYGB)的表达纯化、复性和抗氧化活性.人胞红蛋白基因工程菌DET28a/hCYGB/BL21(DE3)经IPTG诱导表达,包涵体分离,复性,透析和Sephacryl S-200层析分
【机 构】
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中国药科大学,生物化学教研室,江苏南京,210009
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研究人胞红蛋白(Cytoglobin,CYGB)的表达纯化、复性和抗氧化活性.人胞红蛋白基因工程菌DET28a/hCYGB/BL21(DE3)经IPTG诱导表达,包涵体分离,复性,透析和Sephacryl S-200层析分离,获得纯化的rhCYGB.SDS-PAGE和HPLC检测表明rhCYGB纯度达95%以上,紫外光谱分析证明rhCYGB分子含有血红素,圆二色谱分析表明该复性蛋白质具有正确的α-螺旋结构.生化分析及细胞水平试验表明rhCYGB具有过氧化物酶活性和抗氧化活性.小鼠急性乙醇肝损伤模型试验表明rhCYGB能有效保护乙醇所致的肝损伤.研究结果表明经添加血红素复性和纯化所得的rhCYGB具有正确的空间结构和抗氧化活性.
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