【摘 要】
：
基于结构信息及保守序列比对,通过半理性设计和高通量筛选,将来源于Pseudomonas putida的NADPH依赖型谷氨酸脱氢酶PpGDH改造为NADH依赖型.与原始PpGDH相比,突变体PpGDH-D264V对NADH的偏好性(Ratioof kcat/Km)增强了1607倍,并具有对多种酮酸底物的催化活力,可用于制备多种非蛋白质氨基酸.对PpG-DH-D264V进行酶学性质表征,其最适温度为45℃,最适pH值8.0,T110 min/2温度达到58.1℃,在中性及弱碱性环境下具备良好的稳定性,为后续
【机 构】
：
浙江大学 化学工程与生物工程学院 生物工程研究所,杭州 310027
论文部分内容阅读
基于结构信息及保守序列比对,通过半理性设计和高通量筛选,将来源于Pseudomonas putida的NADPH依赖型谷氨酸脱氢酶PpGDH改造为NADH依赖型.与原始PpGDH相比,突变体PpGDH-D264V对NADH的偏好性(Ratioof kcat/Km)增强了1607倍,并具有对多种酮酸底物的催化活力,可用于制备多种非蛋白质氨基酸.对PpG-DH-D264V进行酶学性质表征,其最适温度为45℃,最适pH值8.0,T110 min/2温度达到58.1℃,在中性及弱碱性环境下具备良好的稳定性,为后续应用奠定基础.
其他文献
龙落尾泄洪洞可以大大降低泄洪洞缓坡段的流速,但在龙落尾段其流速仍然较高.在龙落尾起始段设置掺气设施,其佛氏数特性与以往三种类型的掺气设施大不一样,由此,其掺气空腔特性也有不一样的特点.该文在理论分析的基础上,设计了三组12个试验方案,专题研究泄洪洞底坡、掺气坎坎高和挑角等变量在不同来流条件下,掺气坎下空腔回水特性,同时,得到了掺气坎下空腔流态从无回水的净空腔流态到部分回水流态,再到完全回水淹没流态的临界条件.结果 表明:随着工作水头的增加,过坎佛氏数表现为先减后增的特性,整个工作条件下,过坎佛氏数较小;另
该文提出一种双曲孔结构(double-curved hole,DC ho1e)来抑制叶顶泄漏涡(TLV),双曲孔位于叶顶前缘10％-25％弦长处.考虑到泄漏流的旋转曲率效应,采用了曲率修正的SST k-ω湍流模型.数值结果表明,双曲孔可以有效抑制涡流区域,最大涡流面积减小量为50.65％.双曲孔大大地改善了叶顶前缘TLV核心压力,抑制了涡旋低压区的发展,最大涡核压力提高了116％.三种优化方案的空泡体积分数等值面面积分别降低了54.6％、35.7％和13.4％.在双曲孔的作用下,产生了新生涡结构:弱化叶顶
进化树对学习生物进化具有重要的作用.已有研究表明,学生对进化树存在较多错误概念,这些错误概念根深蒂固且难以消除.从解读进化树上生物分类单元的亲缘关系和进化历程2个方面,对常见的进化树错误概念进行梳理与辨析.辨析常见的进化树错误概念可引发学生的认知冲突,帮助学生对已有知识和经验进行重构,进而形成正确解读进化树的能力,以促进学生进一步理解生物进化的本质,形成正确的生物进化观.
气力提升泵作为一种开采提升的理想新型方法之一,具有结构简单和安全可靠等明显优点,研究其具有重要的科学价值和工程意义.根据气力提升系统结构特性,利用Gambit软件构建气液两相流二维气力提升泵模型并进行网格划分;基于fluent仿真软件,利用欧拉模型和SST k-ω湍流模型,借助UDF自编程序讨论变气量,线性开启、线性关闭、阶梯式分段充气和正弦充气四种方式对空气和水气力提升泵水力特性的影响.研究结果表明:在气流线性开启方式下,液体提升流量增加,提升管内气体体积分数升高,总压降减小.在气流线性关闭方式下,液体
沪港通政策是近年来中国资本市场改革中最具影响力的政策之一.自2014年11月实施以来,沪港两地市场的联系显著加强.从实证分析的角度,建立二元时间序列的Copula-GARCH模型,对上证综合指数和香港恒生指数收益率序列的相关性进行分析.结果 表明,以沪港通政策实施为时间节点,互联互通后沪港两地市场的整体相关性较互通前有所提升,同时尾部相关性显著增强,从而证实了沪港通政策的有效性.
食用菌兼具营养丰富、风味独特、健康功能广和生态功能强的优点,是满足人们美好生活需求的物质保障,食用菌产业在打赢脱贫攻坚战中做出了突出贡献.我国食用菌在国内外地位显著.在国际上,我国食用菌年产量占全球总产量的87％以上;在国内,根据国家统计局数据显示,食用菌产值达到2205.2亿元,在种植业中位居蔬菜、谷物、水果、中药材之后,排名第五,超过油料、茶叶、棉花[1].我国食用菌成为名副其实的“小蘑菇,大产业”.
为降低洪水风险并有效地进行洪水管理,研究洪水演进及淹没过程显得尤为重要.该文建立了一套基于非结构网格的二维水动力数值模型,采用三角形网格剖分计算域以适应不规则地形边界,并利用图形处理器(GPU)加速技术以大幅提高模型计算效率,可快速有效地模拟大尺度复杂地形条件下的洪水演进过程,为防洪减灾决策提供强有力的数据支撑.通过三个经典算例研究表明:该模型具有较高的准确性、稳定性和适用性.并将模型应用于Maipasset溃坝后的洪水演进过程,发现计算结果与实测数据吻合较好,计算效率较高,仅用时52 s就完成了溃坝后3
液滴撞击物体表面产生的撞击力对很多自然过程与生产活动都有重要作用.该文采用有限体积法及VOF(volume of fluid)方法数值模拟了液滴撞击覆有液膜的平面的撞击过程,研究了液膜厚度对撞击力的影响.数值计算得到了液滴撞击覆有液膜平面的撞击力瞬时值的变化规律、壁面上的压强分布及其演化规律.研究结果表明:液滴撞击覆有液膜的平面时,覆盖在壁面上的液膜能延缓壁面所受撞击力的上升速率,起到缓冲作用,且其缓冲作用随液膜厚度的增大而增大.随着液膜厚度由零开始增加,壁面所受瞬时撞击力峰值先随液膜厚度增大而增大;瞬时
C2 H2锌指蛋白作为最大的转录因子家族之一,在调节植物生长发育及逆境胁迫应答反应中起着重要作用.以春小麦品种Fielder(Triticum aestivum L.cv.Fielder)为材料克隆到锌指蛋白TaZFP33基因,其编码区全长510 bp,编码169个氨基酸.生物信息学分析得知:TaZFP33蛋白分子质量为17.5 ku,等电点为6.43,属于Q型锌指蛋白,且为不稳定疏水性蛋白.通过系统进化与启动子分析表明该基因可能受ABA诱导的相关胁迫响应.转化烟草进行瞬时表达分析,结果表明TaZFP33
为揭示细胞融合与肿瘤转移之间的分子机制,在前期已经成功构建乳腺癌细胞与巨噬细胞融合模型,发现融合细胞的增殖与转移能力显著增强的基础上,重点分析乳腺癌细胞与巨噬细胞融合对肿瘤细胞增殖转移密切相关的PI3K/AKT和MAPK/ERK信号通路的影响.Western Blot实验结果表明PI3K/AKT和MAPK/ERK信号通路的关键标志蛋白p-PI3K、p-AKT和p-ERK1/2在融合细胞中的表达显著上调,经LY294002和PD98059抑制剂阻断PI3K/AKT和MAPK/ERK信号通路后,融合细胞中p-