【摘 要】
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根据SVCV糖蛋白基因序列设计引物，在5’引物和3’引物中分别引入酶切位点。以病毒核酸为模板用RT—PCR方法扩增该段糖蛋白基因，将所得的基因片段（517和521）克隆至穿梭载体pGAPZaA
【机 构】
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农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所,烟台大学海洋学院,深圳出人境检验检疫局动植食中心水生动物病重点实验室
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根据SVCV糖蛋白基因序列设计引物，在5’引物和3’引物中分别引入酶切位点。以病毒核酸为模板用RT—PCR方法扩增该段糖蛋白基因，将所得的基因片段（517和521）克隆至穿梭载体pGAPZaA／B之GAP启动子下游位点，构建含口信号肽的重组表达载体。获得的重组质粒pGAPZaA-517和pGAPZaB-521经线性化后，电击法转化毕赤酵母SMD1168菌株，构建分泌型表达sVcV糖蛋白的重组酵母菌株。酵母菌落PCR法检测表明，已成功构建分泌表达sVcV糖蛋白的酵母基因工程菌株，斑点印迹法进一步分析表明有目
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