人Delta-like4ext-26-217蛋白原核表达载体的构建及表达

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构建人Delta-like4ext-26-217原核表达载体并表达.采用PCR方法扩增hDll4ext-26-217多核苷酸序列,克隆入pMD18T载体.测序正确后,将其亚克隆入pET32a(+)原核表达载体,获得pET32a(+ )-hDll4ext-26-217载体.以该载体转化E.coli菌株BL21,IPTG诱导其表达.采用SDS-PAGE、Western Blot方法鉴定目的蛋白的表达.结果表明,采用SDS-PAGE,Western Blot等方法均可检测到目的蛋白TRX/hDll4ext-26-217,分子量约42.2 KD.主要以包涵体形式大量存在.以上结果为Detla-like4功能的进一步研究奠定了基础.
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