【摘 要】
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本研究以海参肠为原料,采用p H3.0 50 mmol/L甘氨酸-盐酸缓冲体系,按1∶6（w/v）的料液比,在4℃浸提1 h,获得海参肠组织蛋白酶D的粗酶液。以酸变性牛血红蛋白为底物,进行酶活测定
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31370037);辽宁省教育厅科学研究一般项目(L2015050);大连市高层次人才创新支持计划项目(2015R083)
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本研究以海参肠为原料,采用p H3.0 50 mmol/L甘氨酸-盐酸缓冲体系,按1∶6（w/v）的料液比,在4℃浸提1 h,获得海参肠组织蛋白酶D的粗酶液。以酸变性牛血红蛋白为底物,进行酶活测定,并研究了该酶的酶学性质。结果表明,海参肠组织蛋白酶D粗酶的最适p H为3.0,在p H3.07.0之间稳定性较好;最适反应温度为50℃,在440℃具有较高稳定性。5 mmol/L的金属离子Mg2+、Ca2+、Ni2+、Zn2+、Cd2+和K+对该酶有激活作用,而Fe3+和Fe2+则对其有抑制作用。天冬氨酸蛋白酶抑制剂Pepstatin A对该酶活性有较强的抑制作用。上述结果说明,在本研究条件下提取获得的海参肠组织蛋白酶D粗酶是一种酸性蛋白酶,其组成以天冬氨酸蛋白酶为主。
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