【摘 要】
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亲和层析是一种广泛使用的蛋白质分离纯化技术,常用的亲和标签包括谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签、麦芽糖结合蛋白(MBP)标签、多组氨酸(polyhistidine)标签等.然而,外源亲和标签可能会影响蛋白质的结构与功能,通常需要酶切去除,造成实验流程加长、产率降低.某些蛋白质具有与亲和标签相似的氨基酸序列特征,利用这种序列特征尝试无标签纯化可有效避免上述问题.本研究选取C端天然富含组氨酸残基的长牡蛎电压门控钙离子通道(VGCC)β亚基进行无标签亲和层析纯化,结果显示,氨基三乙酸镍(Ni-NTA)能够特异性
【机 构】
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中国科学院海洋研究所 中国科学院海洋大科学研究中心, 中国科学院和山东省实验海洋生物学重点实验室, 山东 青岛 266071;中国科学院大学, 北京 100049;青岛海洋科学与技术试点国家实验室 海
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亲和层析是一种广泛使用的蛋白质分离纯化技术,常用的亲和标签包括谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签、麦芽糖结合蛋白(MBP)标签、多组氨酸(polyhistidine)标签等.然而,外源亲和标签可能会影响蛋白质的结构与功能,通常需要酶切去除,造成实验流程加长、产率降低.某些蛋白质具有与亲和标签相似的氨基酸序列特征,利用这种序列特征尝试无标签纯化可有效避免上述问题.本研究选取C端天然富含组氨酸残基的长牡蛎电压门控钙离子通道(VGCC)β亚基进行无标签亲和层析纯化,结果显示,氨基三乙酸镍(Ni-NTA)能够特异性地结合无标签的 β 亚基,且结合能力与多组氨酸标签相当.对 β 亚基C端组氨酸残基分组突变后发现,随着组氨酸残基突变的增多,各突变型 β 亚基与Ni-NTA的结合能力逐步下降.免疫印迹实验结果表明,β亚基C端(HG)7序列在针对多组氨酸标签的抗体识别中发挥关键作用.VGCCβ亚基的这种天然序列特征也可应用于该膜蛋白复合体提取过程关键步骤的监测.综上,本研究对氨基酸序列中具有亲和标签特征的蛋白质进行了无标签亲和层析纯化,为具有相似特征蛋白质的分离纯化提供了参考.
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为了摸清中国沿海汇螺科Potamididae物种数量和分布情况,本文采用国际上最新的分类系统,对中国科学院海洋研究所历年来采集积累的汇螺科标本进行系统性的形态分类学研究,共整理鉴定出汇螺科动物5属18种,将分别进行研究报道.本文主要论述了中国沿海汇螺科、塔蟹守螺属Pirenella共9个种类的形态特征、生活习性和地理分布,并对以往鉴定有误和使用混乱的种名进行了修订.为了解中国汇螺资源情况、生物多样性和生态学研究提供基础资料.
本研究介绍了青霉素G残留的危害,并建立了间接竞争酶联免疫分析方法(Enzyme-linked Immunosor-bent Assay,ELISA)检测牛奶类样品中青霉素G的残留量.首先制备出青霉素G的单克隆抗体,在最优实验条件下,青霉素G浓度范围在1～1000 ng·mL-1内,所建立方法的灵敏度(IC50)为17.33 ng·mL-1,检出限为0.75 ng·mL-1.该抗体与苄星青霉素交叉反应率为30.09％,而与氨苄青霉素、羧苄青霉素、阿莫西林、先锋霉素、头孢噻肟钠均无交叉反应.牛奶类样品中青霉素
本研究以科学引文索引(Science Citation Index Expanded,SCIE)和中国知网数据库为基础,利用文献计量方法,对国内外海岛研究相关文献的年代、关键词、研究内容、发文期刊、发文国家及研究机构等进行了全面的统计分析.结果表明:国内外海岛研究的热点主要为海岛旅游业、海岛可持续开发管理、海岛生物群落结构、海岛渔业资源、海岛地理环境等.从文献计量学的角度看,世界各国的海岛研究水平存在一定差距,美国、澳大利亚、英国、日本等发达国家在海岛生态保护与开发利用方面的研究起步早、科研产出较多,相关
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本文提出了一种基于深度学习的热带气旋(tropical cyclone,TC)路径集成预报方法.该方法以长短期记忆深度网络为模型构架,利用前4个时刻(24 h,间隔6 h)及当前时刻的TC路径记录,以及由不同环境因素所计算的方向预报因子作为输入,分别直接预报和间接(通过预报移动速度)预报路径,集成两者预报结果实现时效为24 h的TC路径预报.试验部分使用不同环境因素所对应方向预报因子进行预报,进而探究在该模型中影响TC路径预报的环境因素.结果表明,经纬向风场所计算的方向预报因子对模型预报性能提升较为明显,
锋面和涡旋是南大洋重要的中尺度过程,南极绕极环流(Antarctic Circumpolar Current,ACC)系统中的锋面及其裹携的涡旋构成了能量和物质的东向传播通道,对全球大洋的能量和物质平衡具有重要影响.基于海表高度计和B-SOSE(Biogeochemical Southern Ocean State Estimate,B-SOSE)数据,文中分别对南大洋3条主要锋面2013—2017年的分布特征以及近25 a(1993—2018年)涡旋特征进行了统计分析,结果表明:受背景流场的影响,三条主
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