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茶树RAPD反应系统和扩增程序优化

来源 :茶叶科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：tangmanzhuo
【摘 要】
：
以龙井４３为材料，使用国产ＰＣＲ仪，对茶树ＲＡＰＤ分析中影响ＰＣＲ扩增结果垢因素进行了研究，确定了茶树ＲＡＰＤ的最适反应系统和扩增程序，即在２５μｌ反应体系中，含２５～５０ｎｇ模板ＤＮＡ，２ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２各０．２ｍｍｏｌ／ＬｄＮＴＰｓ，０．２μｍｏｌ／Ｌ引物和０．５～１．０ＵＴａｑＤＮＡ聚合酶；扩增程序为９４℃预变性１８０ｓ，９４℃，变性６０ｓ，３８℃
【作 者】
：
陈亮 高其康 杨亚军 虞富莲 陈大明 
【机 构】
：
中国农业科学院茶叶研究所!杭州,浙江农业大学!杭州
【出 处】
：
茶叶科学
【发表日期】
：
1998年1期
【关键词】
：
茶树 RAPD 反应系统 扩增程序 Tea plant (Camellia sinensis) RAPD Amplification reaction mixt 
【基金项目】
：
九五”国家攻关专题!96-014-01-05,农业部重点专题!95农-01-03-01,中国农业科学院院长基金
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以龙井４３为材料，使用国产ＰＣＲ仪，对茶树ＲＡＰＤ分析中影响ＰＣＲ扩增结果垢因素进行了研究，确定了茶树ＲＡＰＤ的最适反应系统和扩增程序，即在２５μｌ反应体系中，含２５～５０ｎｇ模板ＤＮＡ，２ｍｍｏｌ／ＬＭｇＣｌ２各０．２ｍｍｏｌ／ＬｄＮＴＰｓ，０．２μｍｏｌ／Ｌ引物和０．５～１．０ＵＴａｑＤＮＡ聚合酶；扩增程序为９４℃预变性１８０ｓ，９４℃，变性６０ｓ，３８℃退火９０ｓ，７２℃延伸１２０ｓ，共进行
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