【摘 要】
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目的 探讨减毒沙门菌介导的肝细胞生长因子(HGF)基因治疗对大鼠实验性胃溃疡的效果.方法 构建HGF真核表达载体pcKH,将pcKH和对照质粒pcK转入Ty21a减毒沙门菌中,构建携带pcKH
【机 构】
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730050,兰州军区兰州总医院检验中心甘肃省干细胞与基因药物重点实验室
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目的 探讨减毒沙门菌介导的肝细胞生长因子(HGF)基因治疗对大鼠实验性胃溃疡的效果.方法 构建HGF真核表达载体pcKH,将pcKH和对照质粒pcK转入Ty21a减毒沙门菌中,构建携带pcKH和pcK的阳性工程菌TPH和TP.将40只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、TP治疗组和TPH治疗组,每组10只;TP治疗组、TPH治疗组和模型对照组采用冰乙酸诱导方法制备大鼠乙酸性胃溃疡模型,造模后第5天分别给予5 ml含1×109 cfu TP和TPH的10％ NaHCO3及同体积10％ NaHCO3溶液灌胃,1次/d,共3次.治疗结束后第21天肉眼及镜下观察胃溃疡愈合情况,计算溃疡面积、测量胃黏膜上皮的爬行长度;检测HGF在胃溃疡黏膜组织中的表达水平.结果 成功构建携带HGF基因真核表达质粒的减毒沙门菌.治疗后21 d,病理结果表明TPH治疗组大鼠胃黏膜上皮增生明显,增生黏膜腺体明显扩张,溃疡已由肉芽组织充填,且可见丰富的毛细血管;模型对照组和TP治疗组溃疡愈合不明显.TPH治疗组溃疡面积明显小于模型对照组和TP治疗组[(11 ±3) mm2比(56±6)、(43±4)mm2],差异有统计学意义(P＜0.05).TPH治疗组黏膜上皮增生爬行长度明显大于模型对照组和TP治疗组[(879±8) mm比(821±10)、(817±14) mm],差异有统计学意义(P＜0.05),TPH治疗组胃溃疡黏膜组织中HGF表达水平明显高于模型对照组和TP治疗组[(0.88 ±0.18) μg/g蛋白比(0.51 ±0.08)、(0.34 ±0.15) μg/g蛋白],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 携带HGF基因的减毒沙门菌可促进大鼠胃溃疡黏膜上皮增生,加快溃疡愈合.
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