【摘 要】
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建立一种同时快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌的三重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法.以沙门氏菌invA基因、金黄色葡萄球菌Sa442基因和蜡样芽孢杆菌Cereolysin AB基因为靶基因设计引物和TaqMan探针,建立多重real-time PCR方法,对该方法进行方法学验证,并对实际的散装即食肉制品样品进行检测.结果 表明,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好.对15株非目标菌进行检测,结果均为阴性
【机 构】
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中国肉类食品综合研究中心,北京食品科学研究院,北京 100068
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建立一种同时快速检测沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌的三重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法.以沙门氏菌invA基因、金黄色葡萄球菌Sa442基因和蜡样芽孢杆菌Cereolysin AB基因为靶基因设计引物和TaqMan探针,建立多重real-time PCR方法,对该方法进行方法学验证,并对实际的散装即食肉制品样品进行检测.结果 表明,该方法特异性强、灵敏度高、重复性好.对15株非目标菌进行检测,结果均为阴性;3种致病菌的定量线性浓度范围为102～108 CFU/mL,且定量检测批内和批间的变异系数均小于2％;沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌在未增菌的即食肉制品样品中检出限分别为3.8×102、4.9×102 CFU/mL和5.7×102CFU/mL,经增菌5h后,检出限提高到3.8、4.9CFU/mL和5.7CFU/mL.对100份实际样品进行检测,结果与标准方法一致,说明建立的多重real-time PCR法可以用于散装即食肉制品中3种致病菌的检测.
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