【摘 要】
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目的探讨环指蛋白187(RNF187)表达与肝癌侵袭转移和上皮间变的关系。方法2019年4月至2019年10月，利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测高转移潜能肝癌细胞株(MHCC97-H)和低转移潜能的肝癌细胞株(PLC/PRF/5、HepG2，中国科学院上海生物所)中RNF187的表达。通过慢病毒转染技术沉默RNF187后，RT-qPC
【机 构】
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海南省人民医院 海南医学院附属海南医院肝胆胰外科，海口 570311,海南省人民医院 海南医学院附属海南医院肝胆胰外科，海口 570311,海南省人民医院 海南医学院附属海南医院产科，海口 57031
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目的探讨环指蛋白187(RNF187)表达与肝癌侵袭转移和上皮间变的关系。
方法2019年4月至2019年10月，利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测高转移潜能肝癌细胞株(MHCC97-H)和低转移潜能的肝癌细胞株(PLC/PRF/5、HepG2，中国科学院上海生物所)中RNF187的表达。通过慢病毒转染技术沉默RNF187后，RT-qPCR和Western blot法分别检测RNF187 mRNA及蛋白的表达水平及上皮-间充质转化(EMT)分子标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、黏结合蛋白多糖-1(Syndecan-1)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形纤维蛋白(Vimentin)的表达情况，噻唑蓝(MTT)法和Transwell法分别检测MHCC97-H细胞增殖和侵袭能力的影响。计量资料以均值±标准差(Mean±SD)表示，组间比较采用t检验。
结果高转移潜能组MHCC97-H的RNF187的mRNA表达(0.082±0.006)明显高于低转移潜能组PLC/PRF/5(0.014±0.003)、HepG2(0.017±0.002，t＝41.755、36.248，P均<0.05)，MHCC97-H的RNF187蛋白表达(2.8±0.3)明显高于PLC/PRF/5(1.8±0.2)、HepG2(1.7±0.2，t＝11.030、11.667，P均<0.05)。MHCC97-H-Mock和MHCC97-H-短发卡RNA(shRNA)-RNF187的EMT分子标志物的表达分别为，上皮标志物E-cadherin(0.81±0.08，0.31±0.06)、Syndecan-1(0.70±0.08，0.22±0.07)；间皮标志物N-cadherin(0.28±0.04，0.73±0.09)和Vimentin(0.26±0.03，0.68±0.08)。两组细胞株EMT各分子标志物的表达比较差异有统计学意义(t＝22.312、24.634、19.424、17.854，P均<0.05)，提示MHCC97-H-shRNA-RNF187细胞株EMT过程显著下调。MTT法示，72 h后，MHCC97-H-shRNA-RNF187的增殖能力(2.2±0.4)明显低于MHCC97-H-Mock(4.5±0.6，t＝2.428，P<0.05)。Transwell小室法示，MHCC97-H-shRNA-RNF187组细胞穿过微孔滤膜的细胞数量[(178±67)个]明显少于MHCC97-H-Mock组[(482±73)个，t＝14.563，P<0.05]。
结论RNF187表达可诱导EMT并参与肝癌细胞的侵袭与转移过程。
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