【摘 要】
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目的分离培养人胚胎成肌细胞,观察原代细胞体外增殖与分化特性.方法选择健康妇女捐赠的胎儿骨骼肌标本,参照Blau等的胰蛋白酶与胶原酶混合、多步消化法分离成肌细胞.经差速贴
【机 构】
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华西医科大学附属第一医院骨科,移植免疫实验室
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目的分离培养人胚胎成肌细胞,观察原代细胞体外增殖与分化特性.方法选择健康妇女捐赠的胎儿骨骼肌标本,参照Blau等的胰蛋白酶与胶原酶混合、多步消化法分离成肌细胞.经差速贴壁法纯化后,在含20%胎牛血清的生长培养基中培养,以生长曲线评价其增殖情况;含5%胎牛血清的融合培养基中培养,以磷酸肌酸激酶-MM型合成量及成肌细胞融合率评价其分化能力.通过光镜、透射电镜、免疫细胞化学方法(小鼠抗人肌球蛋白单克隆抗体)鉴定所得细胞.结果电镜下可见所得细胞含大量游离核糖体,肌球蛋白免疫细胞化学染色强阳性,能合成磷酸肌酸激酶,
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