【摘 要】
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目的 探讨幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,HP)感染与线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)碱基突变之间的关系.方法 HP11638(CagA+,VacA+)和HP11638突变株(HP11638M,CagA+,
【机 构】
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上海华东疗养院胃镜室,上海华东疗养院检验科,扬州出入境检验检疫局
【基金项目】
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上海市科委医学领域引导科技攻关项目;
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目的 探讨幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,HP)感染与线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)碱基突变之间的关系.方法 HP11638(CagA+,VacA+)和HP11638突变株(HP11638M,CagA+,VacA-)的提取液与人胃腺癌上皮细胞(human gastric adenocarcinoma epithelial cell,AGS)共同孵育后,收集细胞.提取mtDNA,PCR扩增mtDNA Cox-Ⅰ、Cox-Ⅱ、Cox-Ⅲ、ATPase6、ATPase8、Cytb基因和D-Loop区后测序.结果 AGS细胞mtDNA突变率与两株HP提取液呈浓度及时间依赖关系,经HP11638提取液刺激的AGS细胞mtDNA突变率高于经HP11638M提取液的刺激.在所有616个mtDNA D-Loop区的突变中,489个为点突变,81个为插入,46个为缺失.70.9%(437/616)的突变属于GC→AT和AT→GC的转换.85%(17/20)受刺激的AGS细胞的mtDNA D-Loop区的303PolyC、16184PolyC和514CA等位点发生突变.Cox-Ⅰ、Cox-Ⅱ、Cox-Ⅲ、ATPase6和ATPase8基因未发现突变位点,Cytb基因序列发现3个异质性突变.结论 HP能引起mtDNA特别是D-Loop区的突变积累,VacA蛋白参与了这一过程.
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