【摘 要】
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目的研究G145R突变后乙肝表面抗原（HBsAg） "a" 决定簇合成肽的免疫学特性改变情况。方法首先合成2条短肽P1-wt和P2-145R，分别代表野毒株和G145R突变后HBsAg "a" 决定簇合成肽。然后用β-巯基乙醇（2-ME）变性试验以及用乙肝疫苗标准品制备的小鼠多抗血清研究2条合成肽的空间构象以及抗原性异同。最后用等量合成肽免疫小鼠，用酶免疫法、竞争抑制试验和Western blot
【机 构】
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100052 北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，病毒基因工程国家重点实验室,100052 北京，中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，病毒基因工程国家重点实验室,100052 北京，中国疾病
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目的研究G145R突变后乙肝表面抗原（HBsAg） "a" 决定簇合成肽的免疫学特性改变情况。
方法首先合成2条短肽P1-wt和P2-145R，分别代表野毒株和G145R突变后HBsAg "a" 决定簇合成肽。然后用β-巯基乙醇（2-ME）变性试验以及用乙肝疫苗标准品制备的小鼠多抗血清研究2条合成肽的空间构象以及抗原性异同。最后用等量合成肽免疫小鼠，用酶免疫法、竞争抑制试验和Western blot试验等研究G145R突变后 "a" 决定簇合成肽的免疫原性改变。
结果合成肽P1-wt和P2-145R用2-ME温和变性后，PAGE结果表现为相对分子质量（Mr）为4×103左右的单一条带，而变性前2条合成肽均表现为Mr是从4×103到30×103的弥漫条带，主带位置在5×103和10×103，分别相当于二聚体和四聚体位置；用HBsAg的多克隆抗体（anti-HBs）检测合成肽的抗原性，结果在固定抗原量的前提下，在抗体1:32 000稀释时仍可检测到P1-wt的阳性结果，而当同一抗体稀释到1∶8000时，P2-145R检测结果即为阴性。合成肽P2-145R免疫小鼠产生的抗体与P1-wt合成肽的反应滴度比与P2-145R合成肽本身的反应低4～8倍。
结论针对HBsAg "a" 决定簇合成肽可自发形成一定的空间构象，G145R突变株的HBsAg "a" 决定簇的抗原性和免疫原性与野毒株相比发生了明显改变，为正确评价G145R变异株的流行危害以及现行疫苗的保护效果提供了实验依据。
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