机械刺激对心脏成纤维细胞增殖、活化、凋亡的影响

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目的

观察不同机械刺激对心脏成纤维细胞表型的影响。

方法

采用自主研发的双轴动态培养装置分别以3%、6%、9%的拉伸幅度和1.00、1.33、1.66 Hz的拉伸频率对乳鼠心脏成纤维细胞(CFs)进行机械刺激,以静止状态培养的CFs为对照组,免疫荧光法检测CFs增殖蛋白Ki-67的表达变化,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测活化蛋白胶原蛋白Ⅰ(Col-Ⅰ)、胶原蛋白Ⅲ(Col-Ⅲ)和平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达变化。组间比较采用方差分析,各组与对照组的比较采用Dunnett-t检验。

结果

RT-PCR结果显示,当拉伸幅度为6%时,与静止组比较Col-Ⅰ的表达水平上升(1.51±0.43,t=2.470,P<0.05),差异有统计学意义,当拉伸频率为1.33 Hz时,与静止组比较Col-Ⅰ表达水平的上升(1.54±0.41,t=2.771,P<0.05),差异有统计学意义,机械刺激对Col-Ⅲ、α-SMA,Caspase-3的表达变化则无明显影响;免疫荧光结果显示,机械刺激对Ki-67没有明显影响。

结论

当拉伸幅度为6%、拉伸频率为1.33 Hz时,机械刺激能够引起乳鼠心脏成纤维细胞活化相关蛋白Col-Ⅰ表达的上调。

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