【摘 要】
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构建稳定表达 NMU2R shRNA的重组腺相关病毒载体,制备并纯化靶向性沉默 NMU2R 表达的高滴度重组腺相关病毒。首先设计合成 NMU2R shRNA,退火形成双链与pAAV-ZsGreen-shRNA质
【机 构】
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重庆工商大学环境与资源学院,天然药物研究重庆高校市级重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(81603173);重庆市教委科学技术研究项目(KJ1600607);重庆高校市级重点实验室开放课题(1456032)
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构建稳定表达 NMU2R shRNA的重组腺相关病毒载体,制备并纯化靶向性沉默 NMU2R 表达的高滴度重组腺相关病毒。首先设计合成 NMU2R shRNA,退火形成双链与pAAV-ZsGreen-shRNA质粒 Bam H I和 Hin d III双酶切产物相连接构建形成质粒pAAV-ZsGreen-r NMU2R shRNA,经双酶切和测序鉴定证实,重组质粒克隆正确,将重组质粒转染到AAV-293包装细胞中包装成腺相关病毒载体,成功制备重组腺相关病毒rAAV5-ZsGreen-r NMU2R shRN
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