重组腺病毒HIV-1 vpr基因的构建和表达

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目的构建携带HIV-1 vpr基因的重组腺病毒,使CD4^+T淋巴细胞C8166内源性的高表达Vpr蛋白。方法利用Ad Easy-1系统,通过将含有目的基因片段的穿梭载体pAdTrack.CMV-vpr和骨架质粒pAdEasy.1在BJ5183细菌内同源重组的方法构建重组腺病毒质粒Ad-vpr,用脂质体法将重组质粒转染至HEK293A细胞包装,获得重组腺病毒Ad-vpr,荧光显微镜观察Ad-vpr感染C8166细胞GFP的表达,Western blotting鉴定VDr在C8166细胞内的特异性表达,流式
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