【摘 要】
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目的构建稳定、高效表达重组人心肌肌红蛋白(rhMb)的基因工程菌株.为临床检测早期心肌损伤及预后提供诊断试剂。促进肌红蛋白诊断标准化的研究。方法采用RT—PCR技术从人心肌组
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目的构建稳定、高效表达重组人心肌肌红蛋白(rhMb)的基因工程菌株.为临床检测早期心肌损伤及预后提供诊断试剂。促进肌红蛋白诊断标准化的研究。方法采用RT—PCR技术从人心肌组织总RNA中克隆出全长的人心肌肌红蛋白基因,将其插入到PMD18-T simple克隆载体中,转化DH5α克隆菌株。经酶切和测序对目的基因进行分析,再插入到pET-21a(+)表达载体中,转化BL21(DE3)。对诱导表达的目的蛋白行SDS—PAGE和运用锐普心肌梗死仪检测重组蛋白的抗原性并准确定量。结果测序表明RT—PCR所得的肌红
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