【摘 要】
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目的探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因/丙氧鸟苷(GCV)系统杀伤肿瘤细胞时旁观者效应与细胞间缝隙连接的关系.方法用PA317细胞包装STK质粒(逆转录病毒载体介导的HSV-tk基
【机 构】
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武汉生物制品研究所,武汉大学人民医院
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目的探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因/丙氧鸟苷(GCV)系统杀伤肿瘤细胞时旁观者效应与细胞间缝隙连接的关系.方法用PA317细胞包装STK质粒(逆转录病毒载体介导的HSV-tk基因),形成假逆转录病毒颗粒,转染有缝隙连接的大鼠胶质瘤细胞C6和无缝隙连接的人宫颈癌细胞Hela,制成C6 tk+和Hela tk+细胞,将不同比例的C6和C6 tk+、Hela和Hela tk+细胞混合,每种比例8孔,培养24h后4孔加入含0.5μg/ml GCV的培养基,4孔作对照,6d后用MTT法测量细胞存活率.在两个培养皿中放入周围粘有33mm高滤纸的载玻片,分别接种C6、C6 tk+细胞.细胞80%汇合后将载玻片互换,并加入含0.5μg/ml GCV的培养基,6d后观察细胞形态.结果 C6细胞组存在旁观者效应,Hela细胞组不存在旁观者效应.培养皿中tk+细胞大部分被杀死,tk-细胞无变化.结论 HSV-tk基因/GCV系统杀伤肿瘤细胞时旁观者效应与细胞间缝隙连接有关.
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