【摘 要】
：
目的 原核表达棉铃虫硫酸酯酶1(HaSulf1)蛋白,制备其多克隆抗体.方法 构建原核表达载体,诱导表达,用镍柱纯化重组蛋白,注射免疫小鼠.采血后用ELISA检测多克隆抗体的效价,Western blot法检测其免疫特异性.结果 获得重组质粒,诱导表达得到融合蛋白并成功纯化.ELISA实验检测获得的多克隆抗体效价最高可达到1∶819200.Western blot结果显示该抗体能与体外表达重组蛋白及棉铃虫体内的天然硫酸酯酶结合.结论 原核表达获得重组HaSulf1蛋白并制备了特异性的小鼠多克隆抗体.
【机 构】
：
新疆大学生命科学与技术学院,新疆生物资源基因工程重点实验室,新疆乌鲁木齐830046
论文部分内容阅读
目的 原核表达棉铃虫硫酸酯酶1(HaSulf1)蛋白,制备其多克隆抗体.方法 构建原核表达载体,诱导表达,用镍柱纯化重组蛋白,注射免疫小鼠.采血后用ELISA检测多克隆抗体的效价,Western blot法检测其免疫特异性.结果 获得重组质粒,诱导表达得到融合蛋白并成功纯化.ELISA实验检测获得的多克隆抗体效价最高可达到1∶819200.Western blot结果显示该抗体能与体外表达重组蛋白及棉铃虫体内的天然硫酸酯酶结合.结论 原核表达获得重组HaSulf1蛋白并制备了特异性的小鼠多克隆抗体.
其他文献
高守一,英文名Kao Shou yi,Gao Shouyi,1927年4月29日生于辽宁省奉天市新民县(今辽宁省沈阳市新民市)安福屯村(今属公主屯镇),2011年5月21日卒于北京.rn高守一于1933年人沈阳大南小学,毕业后考入沈阳第六国民高等学校,1943年曾在“豆油组合”任雇员一年.1944入沈阳留日学生预备学校理科就读一年,1945年1月转入沈阳满洲医科大学预科,1945年9月日本投降后人沈阳医学院(1949年2月并人中国医科大学),后又到卡苏里印度中央研究所和孟买哈佛金研究院短期学习.
测试质量是空间引力波测量的核心传感器,宇宙线高能粒子能够穿透航天器屏蔽对其造成电荷注入,进而产生库仑力和洛伦兹力噪声对引力波科学探测造成严重影响.本文采用蒙特卡洛仿真方法,探究了不同宇宙线高能粒子对测试质量的充电过程和机制.研究结果表明,在同一能谱下随着截止能量的降低充电速率逐步增大,充电速率变化约为9％;太阳活动极小年时测试质量的充电速率为39.5+e/s,其中贡献最大的质子占比约为83.16％,太阳活动极大年时测试质量的充电速率约为12.5+e/s,1989年最恶劣的太阳高能粒子事件造成测试质量的充电
置信传播(BP)算法作为推断概率图模型的主流算法是求解随机块模型中联合概率分布的重要方法之一.但现有的方法要么在处理核边结构问题上存在精度不足问题,要么在理论的推导上存在近似太多,导致求解过程复杂且难以理解问题,或两个问题均存在.当然,精度不足也是由近似多造成的.导致理论近似多且推导复杂的主要原因,是随机块模型推断过程中求解联合概率分布并不是直接套用BP算法,即处理的图(网络)与概率图模型的图不统一.因此,本文利用平均场近似修正联合概率分布,使其完全匹配BP算法的迭代公式,这样使得在理论推导上简单易懂.最
目的 研究核苷酸结合寡聚结构域样受体家族胱天蛋白酶募集结构域蛋白3 (NLRC3)对人结肠癌HCT116和LoVo细胞增殖、侵袭和迁移的影响.方法 使用NLRC3特异性小干扰RNA(si-NLRC3)敲低HCT116和LoVo细胞中NLRC3的表达.采用实时定量PCR和Western blot法分别检测结肠癌细胞NLRC3 mRNA和蛋白表达;敲低NLRC3后,采用CCK-8法检测结肠癌细胞的增殖能力,集落形成实验检测结肠癌细胞的集落形成能力,TranswellTM实验检测结肠癌细胞的侵袭能力,划痕愈合实
[目的]旨在以葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠肠炎模型研究猪源乳杆菌Lactobacillus reuteri strain DSM (LR)和Lactobacillus taiwanensis strain BCRC (LT)对肠道炎症的影响.[方法]选取24只8周龄体重相近的C57BL/6J雄性小鼠,随机分为4组(每组6个重复):正常对照组、DSS组、LR菌处理组(DSS+LR)和LT菌处理组(DSS+LT).适应期7d,试验期16d,随后处死小鼠并采样.[结果]与正常对照组相比,DSS组小鼠体重、结肠
目的 探讨长链非编码RNA H19 (lncRNA-H19)对成纤维细胞样滑膜细胞(FLS)功能及对胶原蛋白诱导关节炎(CIA)小鼠模型的影响.方法 分离并培养类风湿性关节炎(RA)患者FLS,利用过表达腺病毒和小干扰RNA(siRNA),分别上调和下调RA FLS的H19表达水平,通过5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)检测RA FLS增殖、TranswellTM实验检测细胞侵袭、细胞划痕实验检测RA FLS迁移能力;建立小鼠CIA模型,关节局部注射H19短发夹RNA慢病毒(LV-sh-H19),通过测量足
[目的]比较持续母乳喂养条件下不同分娩方式的34周龄婴儿肠道菌群差异,探讨分娩方式对较大婴儿肠道菌群发育的影响.[方法]在北京地区招募健康足月分娩母乳喂养婴儿,在34周仍然参与随访的持续母乳喂养婴儿共21例,其中剖宫产婴儿16例、阴道分娩婴儿5例,进行肠道菌群的16S rRNA检测.[结果]两组共21个粪便样本中,共注释到6个门,分别为:疣微菌门、变形菌门、梭杆菌门、厚壁菌门、放线菌门和拟杆菌门;两组共21个样本中共有57个OTU注释到属水平,其中,26个属水平OTU被注释到厚壁菌门,18个属水平OTU被
[目的]以副溶血弧菌VP2918为研究对象,研究其对副溶血弧菌的生物学特性和致病性的影响.[方法]利用同源重组技术构建了vp2918基因的基因缺失株(△vp2918)和互补株(C△vp2918),并对野生株、缺失株和互补株的细菌生长曲线、运动性、生物被膜形成能力、对HeLa细胞的黏附能力、细胞毒性、对小鼠的致死率和组织载菌量进行分析.[结果]缺失vp2918基因不影响副溶血弧菌的生长特性、运动性、生物被膜形成能力以及对HeLa细胞的黏附能力.但与野生株相比,△vp2918对HeLa细胞的毒性作用显著降低;
目的 探讨姜黄素与5-氟尿嘧啶(5-FU)联用对人肝癌细胞的自噬和Yes相关蛋白(YAP)表达的影响.方法 将10 μmol/L姜黄素、10 μg/mL 5-FU单独及联用处理人肝癌HepG2细胞、过表达YAP的稳定HepG2细胞和敲低YAP的稳定HepG2细胞24h,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖,Western blot法检测自噬标志物微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)和YAP表达的变化.结果 当两药联用后,对肿瘤细胞的增殖抑制率明显高于每个单用药组.与对照组相比,姜黄素组、5-FU组和联用组都能
目的 比较不同细胞因子组合联合抗CD3/CD28磁珠体外诱导CD8+中央记忆性T细胞(Tcm)体生成的作用,为CD8+ Tcm过继性免疫疗法的临床应用提供实验依据.方法 分离健康供者外周血单个核细胞(PBMC),应用免疫磁珠法分离纯化初始CD8+T细胞,CD3/CD28抗体偶联磁珠刺激48 h,同时根据细胞因子种类和组合进行分组:白细胞介素2(IL-2)、IL-7/IL-15、IL-7/IL-15/IL-21、IL-7/IL-15/IL-21/IL-23.采用全自动血球计数仪进行细胞计数;5,6-羧基荧光