pcDNA．3．1／myc—His（-）A—HINT1真核表达载体的构建及其在人黑素瘤细胞A375中的表达

来源 :中国麻风皮肤病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nihaobaobeisss

【摘要】

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目的：构建真核表达载体peDNA．3．1／myc—His（-）A—HINT1并检测其在人黑素瘤细胞3．375中的表达。方法：采用巢式RT—PCR的方法扩增带有XbaⅠ和KpnⅠ酶切位点的人HINT1编码区基因，经TA克隆

【作者】

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关杨姜祎群高莹曾学思孙建方

【机构】

：

中国医学科学院皮肤病研究所

【出处】

：

中国麻风皮肤病杂志

【发表日期】

：

2009年9期

【关键词】

：

组氨酸三聚体核苷结合蛋白1 黑色素瘤真核表达稳定转染 HINT1 melanoma stable transfection eukaryotic ex

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目的：构建真核表达载体peDNA．3．1／myc—His（-）A—HINT1并检测其在人黑素瘤细胞3．375中的表达。方法：采用巢式RT—PCR的方法扩增带有XbaⅠ和KpnⅠ酶切位点的人HINT1编码区基因，经TA克隆技术，将基因测序正确的序列克隆到空白真核表达载体peDNA．3．1／myc—His（-）A，构建真核表达载体peDNA．3．1／myc—His（-）A—HINT1。经菌落PCR、双酶切及基因测序鉴定后，用脂质体转染法转染A375细胞，通过G418筛选，获得稳定转染的A375单克隆细胞。用免

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