目的:建立利用仪器分析苯丙哌林未知杂质化学结构的方法,并对2个未知杂质进行结构确证。方法:采用Inertsil ODS-3（4.6μm,2.1 mm×150 mm）色谱柱,以甲醇-0.01 mol·L^-1醋酸铵缓冲液（取醋酸铵0.77 g,加水800 m L溶解,用冰醋酸调节p H至3.3,用水稀释至1 000 m L）（65∶35）为流动相,流速0.25 m L·min^-1,检测波长270 nm。用HPLC-MS/MS分析2个未知杂质,使用制备液相进行分离纯化,通过核磁共振(¹H-NMR、¹³C-NMR、HMBC、HSQC、DEPT135、H-H COSY)技术,对苯丙哌林及其未知杂质进行结构确证。结果:首次发现并确定苯丙哌林2个未知杂质的结构,分别为1-[2-（2-苯甲酰基苯氧基）-1-甲基乙基]哌啶和1-[2-（2-苄基-6-氯苯氧基）-1-甲基乙基]哌啶。结论:该方法可为苯丙哌林的质量控制提供依据。