【摘 要】
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目的研究低温(0～4℃)保存人肝细胞膜Na+、K+、Na+/H+交换、Na+/K+/2Cl-协同转运通道以及Na+/K+-ATP酶的状态.方法胶原酶循环灌注分离人肝细胞; 对照组保存液中不加任何其它试
【机 构】
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110001,沈阳,中国医科大学第一临床学院普外一科暨器官移植科
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目的研究低温(0～4℃)保存人肝细胞膜Na+、K+、Na+/H+交换、Na+/K+/2Cl-协同转运通道以及Na+/K+-ATP酶的状态.方法胶原酶循环灌注分离人肝细胞; 对照组保存液中不加任何其它试剂,实验组保存液中加入不同的离子通道阻滞剂,分别为:氨氯吡咪(Amiloride,A组),丁苯氧酸(Bumetanide,B组),利多卡因(Lidocaine,L组),奎尼丁(Quinidine,Q组) 及Na+/K+-ATP酶阻滞剂哇巴因(Ouabain,O组). 台盼兰染色测定各组的细胞存活率;原子吸收法测定细胞内Na+、K+浓度.结果 (1)细胞存活率:B组与对照组比较差异不显著;A组保存1h、Q组、L组保存12h后,细胞存活率较对照组显著升高;(2)细胞内Na+浓度: 对照组及B组细胞保存的初始阶段显著增高,随着时间的推移又逐渐降低,两组比较,各保存时段差异均不显著;L组保存15min内显著增高,但低于对照组;O组各保存时段均显著高于对照组,A组各保存时段均显著低于对照组;(3)细胞内K+浓度:对照组保存1h内降低,以后逐渐趋于平稳;O组各保存时段均显著高于对照组,Q组则低于对照组.结论各种离子通道阻滞剂对细胞的保存,在不同的方面有着特定的作用.0～4℃保存的人肝细胞膜上,短时间内Na+、K+通道开放,而Na+/H+交换机制异常活跃,起主要作用,Na+/K+/2Cl-协同转运通道基本无活性;Na+/K+-ATP酶保留一定的活性.
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