两种β2m重组质粒的构建及其表达与纯化

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目的 获得大量有活性的人胆β2m重组蛋白,为构建HLA与抗原肽的复合体及HLA四聚体作准备。方法 采用RT-PCR克隆法构建重组质粒,于BL21(DE3)菌中原核表达后,经金属螯合亲和层析纯化,BCA Protein Assay Kit测定蛋白含量,应用SDS-PAGE观察重组蛋白表达情况及Westem blot分析重组抗原的活性。结果 成功地构建了两种融合表达载体PET-22b/β2m及PET-28a/β2m,两者的表达量分别为5-10mg/L,40-80mg/L,纯度均为95%。结论 通过比较,确定了
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