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目的建立无血清悬浮培养MDCK细胞系,分析该悬浮细胞的生长特性、病毒敏感性、代谢动力学特征及生物反应器线性放大的可行性。方法通过逐步降血清和无血清悬浮驯化的方式获得1株MDCK悬浮细胞,检测其病毒敏感性,在1.2L四联平行生物反应器中分析该悬浮细胞以不同初始接种密度(50×104、100×104、150×104、200×104个/mL)培养的细胞生长特性、代谢动力学特征和最佳传代时间,并进行5L到75L生物反应器的线性放大培养。结果贴壁培养型MDCK细胞以3%低血清稳定培养5代后,将该细胞直接适应无血清培养基获得1株MDCK悬浮细胞(命名为MDCK-XF03)并建库,复苏活力为96.8%;细胞接种不同型别的流感病毒均能较好增殖;以不同初始接种密度培养MDCK-XF03细胞,其最大增殖浓度均达1000×104个/mL以上,且差异无统计学意义(P