【摘 要】
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本文旨在探讨TRPC6在低氧高二氧化碳性肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs）增殖和凋亡中的作用。原代培养Sprague-Dawley（SD）雄性大鼠PASMCs,采用
【机 构】
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四川省宜宾卫生学校内科教研室; 黄河科技学院医学院; 温州医科大学病理生理学教研室; 爱荷华大学卡佛医学院心血管医学系; 温州医科大学实验动物中心;
【基金项目】
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supported by Science and Technology Project of Zhejiang Province,China(No.2015C37121);the Key Science and Technology Project of Yibin Municipality,Sichuan Province,China(No.2015SF036)
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本文旨在探讨TRPC6在低氧高二氧化碳性肺动脉平滑肌细胞（pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs）增殖和凋亡中的作用。原代培养Sprague-Dawley（SD）雄性大鼠PASMCs,采用平滑肌α-肌动蛋白免疫荧光染色法鉴定。选用46代的PASMCs,加入无血清DMEM饥饿24 h,随机分为5组:常氧组、低氧高二氧化碳组、DMSO组、TRPC6抑制剂SKF-96365组和TRPC6激动剂OAG组。常氧组置于37°C常氧培养箱（21%O2,5%CO2）中培养24 h,其余4组置于37°C低氧高二氧化碳培养箱（5%O2,6%CO2）中,用不同药物处理24 h。用逆转录聚合酶链式反应和Western blot分别检测TRPC6 m RNA和蛋白的表达;用CCK-8法检测细胞增殖情况;用原位末端标记法检测细胞凋亡;用Fura 2-AM双波长法检测细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)。结果显示,低氧高二氧化碳条件下,PASMCs的TRPC6 m RNA和蛋白表达上调,[Ca2+]i升高,细胞增殖增加,而凋亡减少;OAG可促进低氧高二氧化碳的上述作用,而SKF-96365能够逆转这些作用。以上结果提示,TRPC6参与了低氧高二氧化碳对PASMCs增殖和凋亡的调节。
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