【摘 要】
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目的构建L32-pQE32重组质粒,诱导表达重组钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32,建立以重组外膜蛋白为基础的抗体间接ELISA检测方法.方法采用PCR法从钩端螺旋体DNA中获取编码LipL32的
【机 构】
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军事医学科学院实验动物中心,军事医学科学院微生物流行病研究所,中国药品生物制品检定所
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目的构建L32-pQE32重组质粒,诱导表达重组钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32,建立以重组外膜蛋白为基础的抗体间接ELISA检测方法.方法采用PCR法从钩端螺旋体DNA中获取编码LipL32的基因片段,构建重组克隆载体pGEM-T/L32和表达载体L32-pQE32,转化受体菌E.coliDH5α和E.coliM15,IPTG诱导表达重组LipL32蛋白.Ni-NTA亲和层析纯化重组LipL32蛋白.以纯化的重组LipL32蛋白为抗原,特异的钩体抗血清进行ELISA实验.结果扩增出约750bp的LipL
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目的鉴定pcDNA3-HBsAg-GRA1在哺乳动物细胞内是否表达目的蛋白.方法提取pcDNA3-HBsAg-GRA1质粒;体外培养COS-7细胞;pcDNA3-HBsAg-GRA1经脂质体转染体外培养的COS-7细胞;取转