【摘 要】
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目的:建立多重荧光通道定量PCR方法研究乙酰胆碱Ach对毒蕈碱受体mAchRsⅠ型基因表达的影响。方法:分别用FAM和VIC不同荧光素标记的MGB-TaqMan探针同时对靶基因和看家基因的转
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划资助项目(No.2002AA326064);浙江省卫生厅重点资助项目(No.2002ZD009)
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目的:建立多重荧光通道定量PCR方法研究乙酰胆碱Ach对毒蕈碱受体mAchRsⅠ型基因表达的影响。方法:分别用FAM和VIC不同荧光素标记的MGB-TaqMan探针同时对靶基因和看家基因的转录拷贝数进行多色多通道测定。结果:多重荧光通道定量PCR与单通道荧光定量PCR比较没有差异。Ach作用SK-N-SH细胞24h和72h后mAchR1表达分别上调1.38倍和下降6.71倍(P<0.01)。结论:MGB-TaqMan探针技术在多重荧光RT-qPCR技术中具有高灵敏度和高重复性。Ach对mAchR1 mRNA表达水平有调节作用,并有时间效应。
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