【摘 要】
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目的:基于trnL-F序列并联合HRM技术对天南星类药材及其常见混伪品进行快速有效鉴别。方法:通过PCR扩增测序,应用MEGA 6.0软件对序列特征及遗传距离进行分析,构建系统发育树;
【机 构】
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皖西学院生物与制药工程学院,安徽中医药大学药学院,安徽省石斛产业化开发协同创新中心,
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目的:基于trnL-F序列并联合HRM技术对天南星类药材及其常见混伪品进行快速有效鉴别。方法:通过PCR扩增测序,应用MEGA 6.0软件对序列特征及遗传距离进行分析,构建系统发育树;在特异性位点两端设计引物进行HRM鉴别。结果:序列长度在438~499 bp范围内,GC含量在33.11%~35.59%之间。基于K2P参数模型分析,样品间最大种内平均遗传距离为0.008,而样品间的最小种间平均遗传距离为0.010。在构建的最大简约树和贝叶斯树中,天南星类药材各自聚为单系,且都获得了高度的支持。联合HRM扩增结果分析发现,天南星类群(天南星、异叶天南星、东北天南星)Tm值为77.55±0.16,而虎掌类群Tm值为77.95±0.07,从熔解曲线的峰图上能够明显区分。结论:叶绿体trnL-F序列能够作为天南星类药材的鉴别条形码,并联合HRM技术对天南星类药材进行快速有效鉴别。
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