【摘 要】
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目的本文通过构建带有绿色荧光蛋白的TET1过表达慢病毒载体,观察GFP-TET1在宫颈癌细胞中的亚细胞定位,初步探索TET1在宫颈癌细胞中的作用。方法以含TET1全长cDNA序列的质粒为
【机 构】
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包头医学院乌兰察布临床医学院,嘉兴学院医学院生物教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(编号:NO81402162),内蒙古自治区卫生计生科研计划项目(编号:NO.201703236)
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目的本文通过构建带有绿色荧光蛋白的TET1过表达慢病毒载体,观察GFP-TET1在宫颈癌细胞中的亚细胞定位,初步探索TET1在宫颈癌细胞中的作用。方法以含TET1全长cDNA序列的质粒为模板,通过PCR扩增得到TET1基因,酶切连接后构建pLenti-GFP-TET1过表达慢病毒载体,琼脂糖凝胶电泳和测序验证后,通过包装、感染和嘌呤霉素筛选,获得稳定表达GFP-TET1的人宫颈癌CaSki细胞,通过Western blot检测TET1的表达情况,免疫荧光染色确定TET1亚细胞定位,细胞增殖曲线和软琼脂克隆
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