GFP-TET1过表达稳定细胞系的筛选及功能探讨

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目的本文通过构建带有绿色荧光蛋白的TET1过表达慢病毒载体,观察GFP-TET1在宫颈癌细胞中的亚细胞定位,初步探索TET1在宫颈癌细胞中的作用。方法以含TET1全长cDNA序列的质粒为模板,通过PCR扩增得到TET1基因,酶切连接后构建pLenti-GFP-TET1过表达慢病毒载体,琼脂糖凝胶电泳和测序验证后,通过包装、感染和嘌呤霉素筛选,获得稳定表达GFP-TET1的人宫颈癌CaSki细胞,通过Western blot检测TET1的表达情况,免疫荧光染色确定TET1亚细胞定位,细胞增殖曲线和软琼脂克隆
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