【摘 要】
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[背景]腐霉利(PCM)暴露可致雄性小鼠生殖器官损伤,但其是否与视黄酸(RA)信号通路有关尚不明确.[目的]探讨RA信号通路在PCM致青春期小鼠睾丸损伤中的表达特征.[方法]取64只健康雄性ICR小鼠(3周龄)适应性饲养1周后,随机均分为对照和低、中、高剂量染毒组,每组16只,连续21 d经口灌胃,给予PCM剂量分别为0、50、100、200 mg·kg-1.停止给药1周后处死小鼠,取其血清和双侧睾丸,检测血清中睾酮含量,观察睾丸切片中的组织学变化,用实时荧光定量PCR法、Western blotting
【机 构】
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湖南师范大学医学院预防医学系,湖南 长沙 410013
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[背景]腐霉利(PCM)暴露可致雄性小鼠生殖器官损伤,但其是否与视黄酸(RA)信号通路有关尚不明确.[目的]探讨RA信号通路在PCM致青春期小鼠睾丸损伤中的表达特征.[方法]取64只健康雄性ICR小鼠(3周龄)适应性饲养1周后,随机均分为对照和低、中、高剂量染毒组,每组16只,连续21 d经口灌胃,给予PCM剂量分别为0、50、100、200 mg·kg-1.停止给药1周后处死小鼠,取其血清和双侧睾丸,检测血清中睾酮含量,观察睾丸切片中的组织学变化,用实时荧光定量PCR法、Western blotting法分别测定小鼠睾丸组织中RA信号通路相关基因及凋亡基因Casp9、Casp12 mRNA的表达丰度及CYP26A1、ALDH2、CASP9蛋白水平.[结果]与对照组相比,各剂量染毒组小鼠的整体外观、睾丸外观均无明显改变.病理切片观察:低剂量染毒组小鼠睾丸生精小管出现轻微萎缩,精子生成减少,中、高剂量染毒组小鼠睾丸出现明显的病理损伤(如生精小管管腔扩张,生精上皮受损,精原细胞数量下降,支持细胞部分缺如);随着PCM剂量增加,小鼠生精上皮损伤程度逐渐加重,生精小管中精子数量降低.4组小鼠肛门和生殖器距离、睾丸质量、睾丸容积、睾丸脏器系数的差异均无统计学意义(均P>0.05).低、中、高剂量染毒组小鼠体重分别为(34.91±1.89)、(34.88±1.75)、(32.94±1.37)g,其中高剂量染毒组低于对照组的(35.93±1.99)g;血清睾酮质量浓度分别为(313.77±5.32)、(305.31±3.47)、(304.80±5.28)pg·mL-1,均低于对照组的(319.05±1.92)pg·mL-1(均P<0.05);随着PCM剂量增加,小鼠体重和血清睾酮质量浓度均有下降趋势.高剂量染毒组小鼠Rbp1、Stra6 mRNA表达丰度均高于对照组(均P<0.05);中、高剂量染毒组小鼠Aldh2、Aldh1a1、Aldh1a3、RA核受体相关基因(Rar和Rxr)mRNA表达丰度高于对照组(均P<0.05);中、高剂量染毒组小鼠Cyp26a1、Cyp26b1 mRNA表达丰度均低于对照组(均P<0.05);中、高剂量染毒组小鼠凋亡基因Casp9、Casp12 mRNA表达丰度均高于对照组(均P<0.05).各剂量染毒组小鼠CYP26A1蛋白表达量均低于对照组(均P<0.05),其表达量随PCM浓度增加有下降趋势;中、高剂量染毒组小鼠ALDH2蛋白表达量和各剂量染毒组小鼠CASP9蛋白表达量均高于对照组(均P<0.05),其表达量随PCM浓度增加有升高趋势.[结论]PCM可损伤青春期小鼠睾丸组织,其RA信号通路、Casp9基因、Casp12基因和CASP9蛋白被激活.
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