【摘 要】
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目的 建立MDCK细胞流感疫苗亲和层析工艺。方法 采用Cellufine Sulfate亲和层析柱纯化MDCK细胞流感病毒液，并对洗脱缓冲液盐浓度（0.5、1、1.5 mol/L NaCl）、线性流速（50、100、150 cm/h）及样品浓缩倍数（1、2、5倍）进行优化。采用优化方法连续上样40个柱体积，计算亲和层析结合HA的动态结合载量。采用优化方法检测3批MDCK细胞流感病毒液血凝素（hem
【基金项目】
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国家科技重大专项（2018ZX09737008-003）； 吉林省科技发展计划项目（20200301048RQ）； 中央引导地方科技发展资金（YDZX20202200004719-1）；
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目的 建立MDCK细胞流感疫苗亲和层析工艺。方法 采用Cellufine Sulfate亲和层析柱纯化MDCK细胞流感病毒液，并对洗脱缓冲液盐浓度（0.5、1、1.5 mol/L NaCl）、线性流速（50、100、150 cm/h）及样品浓缩倍数（1、2、5倍）进行优化。采用优化方法连续上样40个柱体积，计算亲和层析结合HA的动态结合载量。采用优化方法检测3批MDCK细胞流感病毒液血凝素（hemagglatinin,HA）含量、宿主DNA残留量和宿主蛋白残留量，并计算HA回收率、宿主DNA去除率及宿主蛋白去除率。同时采用优化方法及分子筛层析Sepharose 4FF纯化同批MDCK细胞流感病毒液，比较纯化效果。结果 最佳洗脱缓冲液盐浓度为1.5 mol/L NaCl，线性流速为100 cm/h，样品浓缩倍数为5倍。最佳条件下纯化产物HA回收率为80%，宿主DNA去除率为99%，宿主蛋白去除率达80%以上。亲和层析结合HA的动态结合载量为2 072μg/mL介质。与分子筛层析Sepharose 4FF比较，Cellufine Sulfate亲和层析纯化样品HA回收率及DNA去除率均有提高，宿主蛋白去除率略有下降。结论 建立的MDCK细胞流感疫苗亲和层析工艺具有较高的杂质去除率，为细胞流感疫苗大规模纯化奠定了基础。
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