【摘 要】
:
【目的】从葡萄中克隆并鉴定钾离子通道基因VviSKOR,在转录水平分析其组织特异性表达特征及对缺钾、氯化钠(NaCl)与脱落酸(ABA)等胁迫的响应情况,通过膜片钳电生理技术研究其
【机 构】
:
鲁东大学农学院/山东省高等学校重点实验室"作物高产抗逆分子模块育种实验室"; 烟台市农业科学院葡萄研究所; 山东省林业科学研究院; 剑桥大学植物系;
【基金项目】
:
国家重点研发计划(2019YFD1000500);山东省农业良种工程基金(2019LZGC009-2);山东省重点研发计划(2018JH2006);国家现代农业产业技术体系专项资金(CARS-29-16)
论文部分内容阅读
【目的】从葡萄中克隆并鉴定钾离子通道基因VviSKOR,在转录水平分析其组织特异性表达特征及对缺钾、氯化钠(NaCl)与脱落酸(ABA)等胁迫的响应情况,通过膜片钳电生理技术研究其生理学功能。【方法】通过同源克隆法,在葡萄基因组中筛选并鉴定钾离子通道基因VviSKOR;借助多种生物信息学软件分析葡萄SKOR及其编码蛋白的特征;利用MEGA 7.0软件建立葡萄、拟南芥、水稻、玉米、高粱、短柄草、大豆、番茄、黄瓜、白杨、桃、梨、草莓、苹果、木瓜、柑橘、香蕉、凤梨等18种不同科属植物SKOR同源蛋白成员的系统进化树;利用实时荧光定量PCR分析VviSKOR在葡萄不同组织部位的表达模式及对缺钾、NaCl、ABA与sorbitol等胁迫的响应情况;利用膜片钳电生理系统分析葡萄VviSKOR的生理学功能。【结果】在葡萄基因组中克隆获得一个钾离子通道基因VviSKOR,其编码蛋白含有环核苷酸结合域、离子通道跨膜域、Ankyrin repeats和KHA功能结构域,属于典型的Shaker类钾离子通道;18种不同科属植物SKOR蛋白在氨基酸水平具有58.92%的一致性,系统进化树表明葡萄VviSKOR与黄瓜CsaSKOR紧密聚在一起,其遗传进化关系上较近,4种禾本科植物(玉米、水稻、短柄草和高粱)SKOR家族成员在系统进化树上更倾向于聚在一起,而同属蔷薇科植物(草莓、苹果、梨和桃)SKOR在进化关系上紧密聚在一起;亚细胞定位预测表明葡萄VviSKOR蛋白主要定位于细胞质膜,且含有6个跨膜区,其等电点PI为6.24,表明该蛋白含有偏酸性氨基酸残基较多;在VviSKOR启动子区域预测到12种顺式作用元件,主要包括胁迫响应、激素响应和细胞周期调控等不同生命活动相关的调控元件;数据库表达谱分析结果表明葡萄VviSKOR在多种组织或器官中均有表达,在葡萄树根中的表达水平最高,其次是叶和木质部;实时荧光定量PCR分析表明VviSKOR在7年生‘马瑟兰’葡萄树根部和幼苗根部的表达水平均最高;幼苗中,VviSKOR在转录水平对高钾处理没有响应,但对缺钾、ABA和NaCl胁迫处理较为敏感,其在检测幼苗根部、茎部和叶片中的表达量均被缺钾和ABA抑制而降低,却受NaCl胁迫诱导而显著增强;转染pTracer-CMV3-SKOR质粒的HEK293-T细胞记录到外向电流,且随细胞外钾离子浓度的增加而降低,表明VviSKOR为一外流型钾离子通道,此外,记录到的电流随着电压的增加而增加,说明VviSKOR也是电压依赖型钾离子通道。【结论】葡萄VviSKOR与黄瓜CsaSKOR在遗传进化关系上最为相近;VviSKOR主要在葡萄根部(成年树和幼苗)表达,幼苗中VviSKOR在转录水平受缺钾、ABA和NaCl胁迫的调控;VviSKOR是葡萄根部主导钾离子外排的钾离子通道。
其他文献
设H是有限维Hopf代数,A是右H模代数,记A的H-不变子代数A^H为B。在第1部分中,本文引进了A是B-理想的概念。定理1和2证明了A是B-理想模当且仅当A作为A#H-模是自生成子且是内投射的。
模拟和模型是视觉研究的重要手段,本文应用计算机的模拟手段,分别对GC感受野的双高斯差模型和外周相互抑制网络模型的空间响应分布特性进行了研究,并观察了它们的边缘检测性能。本文的结果将为GC感受野视觉计算原理的进一步探索,以及以视觉原理为依据的图象技术的改进提供帮助。
摘要:本文采用文献资料法、专家访谈法、问卷调查法、数理统计法对体育教育训练学专业学位研究生进行调查研究,研究的意义在于剖析目前体育硕士专业学位研究生实践中存在的主要问题,进而提供合适的发展及改进策略,为的培养体育专业学位研究生提供参考。 关键词:体育教育训练学研究生;体育实践能力;培养 本文以《延安大学体育教育训练学培养方案(2012)》为理论依据,旨在了解延安大学体育学院体育教育训练学硕士研
学习物理应该把主要精力放在哪里?按我在校内和电视大学教学中的体会,概括为一句话,就是要在掌握基率概念上多下功夫。事实说明;基本概念清楚才能牢固地掌握知识,做题也并不困难;概
2012年5月就职的法国现任总统奥朗德,在竞选期间曾提出调整萨科奇政府时代的大学投资差别化政策,并对《大学自由与责任法》进行修订。那么,在过去近一年的时间里,奥朗德政府
摘要:中国逐渐加速向消费驱动型经济转型,体育产业也开始寻求新的消费模式和消费场景。新消费的大环境下,用户在场景内的实际体验变得更加重要,更高的需求和更深的行业细分也带来了更多商业机会,滑雪场逐步转型为冰雪小镇,除了打造一流的服务和配套设施以外,文化建设也格外重要。 关键词:体育旅游;冰雪体育小镇;冰雪文化 一、研究背景与目的 中国正在向消费驱动型经济转型。目前,中国中产阶级的数量已经达到2.
本文就Vlookup函数的功能、语法和应用方法等进行剖析研究,结合笔者进行学生体质健康测试成绩的数据整理案例,对该函数的应用进行阐述,实验。结果发现Vlookup函数对于体质健
今有二带电量为q的点电荷,具有相同的初速度v,彼此相距为r,且r的方向与v垂直。试证明,在无其它外场作用下,欲保持此二电荷作匀速直线运动将是不可能的。
本文综述了各向异性磁电阻(AMR).巨磁电阻(GMR),特大磁电阻效应(CMR)以及隧道磁电阻效应(TMR)的实验结果及理论模型
目前通用的针孔滤波器存在调整困难及对大功率激光器因聚焦原因易产生空气电离与烧蚀基底等弊病,影响光束质量,本文用自行研制的红敏光致聚合物感光材料制成全息滤波器,从理论与