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目的
研究骨髓间充质干细胞(MSC)对钙化血管平滑肌细胞(CSMC)的调控作用。
方法以地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C作为钙化诱导剂(OS)诱导血管平滑肌细胞(SMC)钙化从而建立CSMC模型，采用Von Kossa染色法评估钙化情况。随后将MSC与CSMC以1∶1的比例分别培养于12孔Transwell板上室和下室，建立MSC干预CSMC模型。继而将SMC分为4组：正常组：正常SMC；钙化诱导剂组：SMC＋OS；钙化细胞组：CSMC；MSC干预组：CSMC＋MSC。其中，钙化诱导剂组应用OS培养基培养，其余各组均使用普通培养基培养。干预14 d后收集各组SMC，检测碱性磷酸酶(AKP)活性评估SMC钙化情况，Western blot技术检测SMC中Wnt5a及β-catenin蛋白表达。
结果与正常组比较，钙化诱导后CSMC矿化结节明显增加，且钙化诱导剂组及钙化细胞组AKP活性、Wnt5a及β-catenin蛋白表达水平均明显升高。钙化细胞组与钙化诱导剂组比较，AKP活性、Wnt5a及β-catenin蛋白表达水平有所降低。不论与钙化诱导剂组还是钙化细胞组比较，MSC干预组上述检测指标均明显降低。
结论MSC与CSMC间接接触可降低CSMC钙化程度，其可能通过旁分泌途径阻断Wnt5a/β-catenin通路从而减轻钙化。