【摘 要】
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目的探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)在同型半胱氨酸(Hcy)致泡沫细胞胆固醇聚积中的作用和意义。方法体外复制THP-1单核细胞/泡沫细胞模型,油红O染色验证模型复制是否成功,给予10
【机 构】
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宁夏医科大学基础医学院,四川大学基础医学与法医学院,宁夏医科大学临床学院,
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目的探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)在同型半胱氨酸(Hcy)致泡沫细胞胆固醇聚积中的作用和意义。方法体外复制THP-1单核细胞/泡沫细胞模型,油红O染色验证模型复制是否成功,给予100μmol/L Hcy处理细胞24 h后,实时定量PCR和Western blot检测泡沫细胞中FABP4 mRNA和蛋白的表达;体外构建FABP4过表达载体,双酶切法鉴定;转染FABP4至泡沫细胞,荧光倒置显微镜观察转染效率;胆固醇检测试剂盒检测细胞内胆固醇聚积情况。结果油红O染色显示泡沫细胞质内充满了大量红染脂质颗粒,胞核呈蓝色,且100μmol/L Hcy处理后细胞内胆固醇含量升高了2.4倍(P<0.01);实时定量PCR结果显示100μmol/L Hcy处理后泡沫细胞中FABP4 mRNA表达上调(P<0.01);Western blot检测结果显示FABP4的蛋白表达与其mRNA表达变化一致(P<0.01)。FABP4过表达载体转染细胞后,可见大量绿色荧光蛋白表达;重组质粒组泡沫细胞中FABP4的表达水平明显升高(P<0.01),细胞内胆固醇含量升高1.9倍,差异具有显著性(P<0.01)。结论 FABP4表达上调可能是Hcy致泡沫细胞胆固醇聚积的重要机制之一。
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