【摘 要】
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目的 探讨内质网应激是否参与高磷诱导血管平滑肌细胞钙化及其作用机制。方法 体外培养人胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMC），分为对照组、正常磷组（1.3 mmol/L磷，NP组）、高磷组（2.6 mmol/L磷，HP组），培养10 d。茜素红染色后观察细胞钙盐沉积情况；实时定量PCR和Western blotting检测肌醇需求因子1 （IRE1）、RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶（PERK）、内质网
【基金项目】
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河北省医学研究课题计划（20200181）；
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目的 探讨内质网应激是否参与高磷诱导血管平滑肌细胞钙化及其作用机制。方法 体外培养人胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMC），分为对照组、正常磷组（1.3 mmol/L磷，NP组）、高磷组（2.6 mmol/L磷，HP组），培养10 d。茜素红染色后观察细胞钙盐沉积情况；实时定量PCR和Western blotting检测肌醇需求因子1 （IRE1）、RNA依赖的蛋白激酶样内质网激酶（PERK）、内质网应激标志蛋白C/EBP同源蛋白（CHOP）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）、骨形态发生蛋白2 （BMP-2）及Runt相关转录因子2 （Runx-2）的表达；应用CHOP siRNA转染高磷培养VSMC敲低CHOP表达后，检测BMP-2及Runx-2表达；应用JNK抑制剂SP600125 （DMSO溶解），终浓度10μmol/L预处理30 min后加入高磷培养基培养10 min，茜素红染色观察钙沉积情况。结果 与对照组及NP组比较，HP组内质网应激蛋白（IRE1、PERK、JNK、CHOP）及钙化蛋白（BMP-2、Runx-2）均明显增高（均P ＜0.01）。敲低CHOP表达后钙化蛋白BMP-2及Runx-2表达均下调（均P ＜0.05）。应用JNK抑制剂SP600125预处理的高磷培养VSMC钙沉积减轻。结论 内质网应激参与高磷诱导的VSMC钙化，其作用机制可能是激活了pPERK-CHOP和IRE1-p-JNK两条途径。
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