wnt5a基因修饰bMSCs对HL60细胞生长分化影响的研究

来源 :四川大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:ruyingxiangsui1989
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的探讨外源性wnt5a基因修饰的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,bMSCs)支持骨髓造血及抑制白血病细胞HL60生长的双重作用,为白血病治疗提供新的思路。方法用流式细胞仪鉴定所培养的bMSCs,重组腺病毒Ad5-wnt5a对bMSCs进行基因修饰,RT-PCR检测wnt5a的表达,流式细胞仪检测wnt5a基因修饰bMSCs的效率,描绘不同处理组(bMSCs组,Ad5-GFP组,Ad5-wnt5a组)的细胞生长曲线。采用外源性wnt5a基因修饰的bMSCs与HL60细胞共培养的方法,利用免疫细胞化学染色法和流式细胞仪检测各处理组(HL60细胞组,HL60+bMSCs组,HL60+Ad5-GFP组,HL60+Ad5-wnt5a组)细胞表面分化抗原CD13、CD14、CD68以及细胞分化周期的变化。结果腺病毒成功将外源性wnt5a基因转染bMSCs;HL60+Ad5-wnt5a组细胞单核细胞系表面标志抗原CD14、CD68表达高于对照组(P<0.05),而粒细胞系表面标志抗原CD13表达与对照比较差异无统计学意义(P>0.05);HL60+Ad5-wnt5a组细胞自第3 d开始,细胞周期阻滞在G2期。结论外源性wnt5a促进bMSCs增殖,抑制HL60细胞的生长并可诱导HL60细胞向成熟方向分化。 Objective To investigate the dual roles of exogenous wnt5a gene-modified bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) in supporting bone marrow hematopoiesis and inhibiting the growth of leukemia HL60 cells, and to provide a new idea for the treatment of leukemia. Methods The cultured bMSCs were identified by flow cytometry. The recombinant adenovirus Ad5-wnt5a was used to genetically modify bMSCs. RT-PCR was used to detect the expression of wnt5a. Flow cytometry was used to detect the efficiency of wnt5a gene-modified bMSCs. Group, Ad5-GFP group, Ad5-wnt5a group). The cocultures of exogenous wnt5a gene-modified bMSCs and HL60 cells were studied by immunocytochemical staining and flow cytometry (HL60 cell group, HL60 + bMSCs group, HL60 + Ad5-GFP group, HL60 + Ad5-wnt5a group) on the cell surface differentiation antigen CD13, CD14, CD68 and cell differentiation cycle changes. Results The adenovirus successfully transfected exogenous wnt5a gene into bMSCs. The expression of CD14 and CD68 on HL60 + Ad5-wnt5a cells was higher than that of the control group (P <0.05), while the expression of granulocyte-derived surface marker antigen CD13 There was no significant difference between the two groups (P> 0.05). The cells in HL60 + Ad5-wnt5a group started on day 3 and the cell cycle arrest was in G2 phase. Conclusion Exogenous wnt5a can promote the proliferation of bMSCs, inhibit the growth of HL60 cells and induce the differentiation of HL60 cells toward maturation.
其他文献
笔者1988年3月至1991年4月采用羊肠线引流包埋法治疗睾丸鞘膜积液8例,取得了较好的疗效,报告如下: 本组年龄9岁~56岁,均为原发性非交通型单侧睾丸鞘膜积液。病程6个月~28年.
本文研究了新显色剂5-(对羧基苯偶氮)-8-羟基喹啉(P-CPHQ)与钴(Ⅱ)的显色反应条件,在阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)存在下及pH4.8~5.8缓冲介质中,形成稳定的红色络合物,其最大吸收波长为510nm,ε=7.96×104Lmol-1cm-1,含钴量
耳源性肺脓肿临床比较少见。近年来,随着抗生素的广泛应用,该病更为减少,因而易被忽视、误诊。患儿,男、11岁。因畏寒、发热、咳嗽、腹胀痛3月,加重1周于1990年1月9日入儿科
中部向西部过渡的地区在我国整体发展格局中具有极为重要的战略地位。加快这一地区的经济发展,对西部大开发以及促进全国经济协调发展具有重要意义。如何加快中西部过渡地区
患儿,男,1.7岁。第1胎、足月产,第一产程长。发育迟缓、智力低下,哭声似猫叫,声音微弱。患儿抵抗力差,易“感冒”、发热,曾患一次肺炎,经常夜间哭闹,全身软,坐立不稳,尚不会
为加强注册税务师行业管理,促进行业健康有序发展,根据国家税务总局《注册税务师管理暂行办法》以及《中国注册税务师协会年度检查工作实施办法》,全行业顺利完成了2010年会
声乐文化是特定社会的一定声乐艺术活动和时间的总和,它能渗入到人类生活的过程和目的当中,作为一种社会意识形态,必然反映一定社会和经济样貌。本文结合声乐文化回归的含义,
本文统计我院1977年至1987年12月在急诊科(室)处理的急危重症4768例,依年度顺序分为三组,分别从性别、年龄、病种、发病数、处理后去向进行分析,提示:1985年以后在抢救室处
已经快下午六点钟了,王小涛和曾辉的家长还没来接孩子。我站在阳台上看着楼下接孩子的家长越来越少,心里也替那两个看起来玩得高兴、其实多少显得有点无奈的小人儿焦急起来
患者男,60岁。1991年5月3日因跌伤致右髋疼痛活动障碍55天而入院,查:右下肢缩短外旋内收畸形,肌肉萎缩,右腹股沟中点外侧隆起,该处可触及一直径约 Male patient, 60 years o