【摘 要】
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为构建结核分枝杆菌H37Rv菌株中未知基因Rv1767的异源表达载体并探究该基因对分枝杆菌胁迫应答的影响。通过软件在线分析Rv1767的氨基酸序列及其编码蛋白的基本性质，PCR扩增Rv1767基因并添加Myc标签，构建异源表达该基因的重组耻垢分枝杆菌Ms＿Rv1767与空载菌Ms＿vec。首先通过WesternBlot检测分析目的蛋白的表达情况，再分析表达该蛋白对菌株生长及形态的影响以及对菌株在不
【基金项目】
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吉林省科技发展计划重点研发项目（20210204038YY）；
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为构建结核分枝杆菌H37Rv菌株中未知基因Rv1767的异源表达载体并探究该基因对分枝杆菌胁迫应答的影响。通过软件在线分析Rv1767的氨基酸序列及其编码蛋白的基本性质，PCR扩增Rv1767基因并添加Myc标签，构建异源表达该基因的重组耻垢分枝杆菌Ms＿Rv1767与空载菌Ms＿vec。首先通过WesternBlot检测分析目的蛋白的表达情况，再分析表达该蛋白对菌株生长及形态的影响以及对菌株在不同压力下存活能力的影响：表面活性（SDS）、氧化(H2O2)、热压力、酸性压力。结果显示，该基因全长360 bp，共编码119个氨基酸，蛋白大小为12.5 kDa，分子式是C544H871N165O163S5，生物信息学分析预测该蛋白为稳定的、疏水性较弱的蛋白。本试验成功构建未知基因Rv1767的异源表达菌株，发现该基因编码的蛋白可以在耻垢中表达，表达产物使菌株生长缓慢，还降低了菌株在不良条件下的生存能力。有助于后续对结核分枝杆菌Rv1767基因功能的探究，为进一步解析结核分枝杆菌的致病机制奠定了基础。
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