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以甘蓝型油菜湘油15号和紫罗兰的下胚轴为材料,分离制备原生质体。采用PEG-高Ca2+高pH法进行原生质体融合,在PEG浓度为30%,原生质体融合密度为5.0×10^5个/mL下融合25min,融合率可达17%。在附加1.5mg/L2,4-D,0.5mg/LNAA,0.5mL/LBA的改良的KM8p培养基中,以0.3mol/L蔗糖和0.1mol/L葡萄糖作渗透稳定剂进行液体浅层培养融合体,培养3~6d细胞发生第1次分裂,7d时统计分裂频率最高为13.8%,35d后形成大量的细胞团和肉眼可见的小愈