哺乳期多溴联苯醚-153染毒对成年大鼠皮质细胞内钙离子浓度和钙激活相关酶的影响

来源 :中华劳动卫生职业病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:new_java
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目的 研究哺乳期多溴联苯醚-153(BDE-153)染毒对成年大鼠皮质细胞内钙离子浓度和钙激活相关酶水平的影响,为研究多溴联苯醚的神经发育毒性提供科学依据.方法 40只雄性新生乳鼠按体重和窝别随机分成1、5、10 mg/kg BDE-153组和橄榄油溶剂对照组,每组10只.在出生第10天,染毒组按0.1 ml/10 g体重一次腹腔注射染毒BDE-153,橄榄油溶剂对照组给予同剂量橄榄油.染毒后2个月时处死大鼠,冰皿上迅速分离大脑皮质,用流式细胞仪测定细胞内Ca2+浓度,用比色法测定钙调神经磷酸酶(CaN)、Ca2+,Mg2+-ATP酶活力,实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测钙激活蛋白酶calpain-1和calpain-2的基因和蛋白表达.结果 对照组、1、5和10 mg/kg BDE-153组大鼠皮质细胞内Ca2+平均荧光强度分别为10.83、1.48、1.93和0.62,各染毒组细胞内Ca2+浓度均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).各染毒组CaN酶活力、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力、calpain-1基因和蛋白表达量与对照组的差异无统计学意义(P>0.05).随着BDE-153染毒剂量的增加,BDE-15染毒组calpain-2蛋白的表达量逐渐升高,与对照组[基因:(0.81±0.26),蛋白:(0.15±0.07)]比较,5、10 mg/kg BDE-153组calpain-2的基因[5 mg/kg BDE-153组:1.16±0.52,10 mg/kg BDE-153组:1.32±0.23]及蛋白表达量[5 mg/kgBDE-153组:0.31±0.07,10 mg/kg BDE-153组:0.37±-0.06]明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);10 mg/kgBDE-153组calpain-2的蛋白表达量(0.37±0.06)明显高于1 mg/kg BDE-153组(0.22±0.07),差异有统计学意义(P<0.05).结论 Ca2+介导的calpain-2激活可能是BDE-153神经毒性的主要机制之一。

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