【摘 要】
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目的 对动员的外周血单个核细胞(PBMNC)和动员的去除CD34+细胞的PBMNC移植治疗裸鼠下肢缺血的疗效进行比较,以探讨PBMNC的治疗机制.方法 经过单采获得G-CSF动员的PBMNC后,一
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目的 对动员的外周血单个核细胞(PBMNC)和动员的去除CD34+细胞的PBMNC移植治疗裸鼠下肢缺血的疗效进行比较,以探讨PBMNC的治疗机制.方法 经过单采获得G-CSF动员的PBMNC后,一部分通过CD34磁珠抗体分选得到去除CD34+细胞的PBMNC.动员的PBMNC和动员的去除CD34+细胞的PBMNC荧光标记后按1×106细胞或相应体积的PBS分别局部肌肉注射移植到裸鼠缺血下肢.观察下肢血流灌注以及毛细血管密度.用ELISA法检测下肢肌肉的血管内皮生长因子(VEGF)表达,并进一步观察表达的VEGF是否由移植细胞分泌.结果 PBMNC移植后缺血下肢血流明显恢复,毛细血管密度明显增加,但去除CD34+细胞的PBMNC移植组疗效有所下降.细胞移植后4周,PBMNC组的血流灌注由(20.3±4.2)%恢复为(96.4±5.6)%,对照组仅恢复为(71.3±4.4)%(P＜0.01),去除CD34+细胞组恢复为(83.8±5.2)%(P＜0.05).PBMNC组血管密度为(521±47)/mm2,去除CD34+细胞组为(396±21)/mm2(P＜0.05),但仍高于对照组[(276±43)/mm2](P＜0.05).在PBMNC组可以观察到移植的细胞整合到缺血的毛细血管壁.缺血肌肉VEGF的表达明显升高,其共表达VEGF和移植的单个核细胞.结论 移植G-CSF动员的PBMNC不但可以通过干细胞整合到血管壁的机制促进血管生长,还可以通过提供细胞因子的机制促进血管生长.去除CD34+细胞削弱了动员的PBMNC移植治疗肢体缺血的血管新生效应.
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