【摘 要】
：
目的:探讨虫草素抑制人肝癌细胞增殖并促其凋亡的分子机制.方法:采用干扰小RNA(siRNA)技术沉默胶质肿瘤相关癌基因同源物1(Gli1)基因并转染SMMC-7721细胞,细胞增殖与活性检测(CCK-8)及细胞克隆实验检测细胞增殖能力;使用不同剂量的虫草素对肝癌细胞进行干预,检测肝癌细胞的增殖、凋亡情况.使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Gli1及其下游相关基因的表达情况.结果:与正常肝细胞比较,Gli1在SMMC-7721肝癌细胞
【机 构】
：
广西中医药大学附属瑞康医院,南宁530011
论文部分内容阅读
目的:探讨虫草素抑制人肝癌细胞增殖并促其凋亡的分子机制.方法:采用干扰小RNA(siRNA)技术沉默胶质肿瘤相关癌基因同源物1(Gli1)基因并转染SMMC-7721细胞,细胞增殖与活性检测(CCK-8)及细胞克隆实验检测细胞增殖能力;使用不同剂量的虫草素对肝癌细胞进行干预,检测肝癌细胞的增殖、凋亡情况.使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Gli1及其下游相关基因的表达情况.结果:与正常肝细胞比较,Gli1在SMMC-7721肝癌细胞中的mRNA及蛋白表达水平显著升高(P＜0.01).CCK-8及克隆形成实验结果显示,与空白组比较,干扰沉默Gli1组SMMC-7721细胞72,96 h的增殖率降低(P＜0.05,P＜0.01);细胞集落形成能力显著降低(P＜0.01).虫草素干预后,与空白组比较,虫草素80,120 μmol· L-1组72,96 h肝癌细胞的增殖明显降低(P＜0.05,P＜0.01).凋亡实验结果显示,与空白组比较,虫草素80,120 μmol· L-1组SMMC-7721肝癌细胞凋亡显著增加(P＜0.01).Real-time PCR及Western blot实验显示,虫草素80,120 μmol·L-1组Gli1在SMMC7721细胞中的mRNA及蛋白表达水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01);虫草素120 μmol· L-1组B细胞淋巴瘤-2 (Bcl-2)和原癌基因(c-Myc) mRNA和蛋白表达降低(P＜0.05,P＜0.01),半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3) mRNA和蛋白表达增加(P＜0.05).结论:Gli1在肝癌中高表达.虫草素可通过对Gli1及其下游与凋亡相关因子的调控从而抑制肝癌增殖并促肝癌细胞凋亡.
其他文献
目的:钩吻配伍玉叶金花对外排转运蛋白乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和细胞色素P450 3A11(CYP3A11)的影响,探讨其配伍减毒的机制;同时添加核受体激活剂干预探讨核受体是否在该过程中有调节作用.方法:将C57BL/6小鼠分为空白组,钩吻组(GE组,0.25g·kg-1),钩吻配伍玉叶金花组(GE+MP组,0.25g·kg-1+10g·kg-1),钩吻+孕烷X受体(PXR)激活剂(利福平)组(GE+Rif组,0.25g·kg-1+50 mg·kg1),配伍+利福平组(GE+MP+Rif组,0.25g·k
目的:观察补肺益肾方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道黏液高分泌及Notch信号通路相关蛋白Notch3,HES家族发状分裂相关增强子1(HES1)的影响,探讨其作用机制.方法:将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、补肺益肾方组和氨茶碱组,每组12只.第1～12周,采用香烟烟雾暴露联合反复细菌感染方法制备COPD稳定期大鼠模型;第13～20周,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,治疗组给予相应药物灌胃(补肺益肾方组3.7g·kg-1·d-1,氨茶碱组54mg·kg-1·d-1).第20周灌胃结束后取材,
目的:基于人髓系白血病单核细胞(THP-1)与肠上皮细胞(Caco-2)共培养体系,研究人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb,对脂多糖(LPS)诱导的THP-1细胞炎症因子释放的影响,及其对THP-1细胞活化致Caco-2细胞炎性损伤的保护作用.方法:首先制备THP-1与Caco-2细胞共培养微流控芯片,实验分为空白组、LPS组和给药组.空白组细胞正常培养;LPS组在上层Caco-2细胞形成单层屏障后,在下层THP-1细胞中加入LPS(1 mg·L-1);给药组在LPS组的基础上在THP-1细胞中分别加入 33
肥胖和糖尿病发病率的增加已使糖尿病肾病(DKD)成为慢性肾病和终末期肾病的主要原因.尽管目前有优化血糖控制和肾素-血管紧张素系统抑制等药物干预,但肾脏疾病进展和并发症的风险仍然很高.目前DKD发病机制尚未完全明确,包括慢性炎症反应、氧化应激、糖脂代谢紊乱、血流动力学异常等,近年研究发现肾脏固有细胞的程序性死亡(PCD)如细胞焦亡及坏死性凋亡对DKD发生发展有关键作用.细胞焦亡和坏死性凋亡是新近发现的细胞程序性死亡的两种途径,虽然这些细胞死亡程序可以保护宿主免受病原微生物的侵害,但他们的失调与多种自身免疫和
目的:研究黄芩素介导黏着斑激酶(FAK)调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路影响胃癌HGC-27细胞增殖和迁移的作用和可能的分子机制.方法:使用黄芩素(0、5、15、25、50 μmol·L-1)处理胃黏膜上皮GES-1细胞、胃癌HGC-27细胞48 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同浓度黄芩素干预对FAK、上皮细胞-间质转化(EMT)及PI3K信号通路相关蛋白表达情况.利用慢病毒转染技术,构建稳定过表达FAK的胃癌HG
目的:考察雷公藤甲素(TP)阿魏酸醇质体凝胶经皮给药长期应用的安全性.方法:制备TP阿魏酸醇质体凝胶低、中、高剂量组(TP低、中、高剂量组)和空白组,对雄雌各半的SD大鼠进行破损皮肤和完整皮肤的分组后,每日经皮给药剂量TP低、中、高剂量组分别为63.75、127.50、255.00 μg·kg-1,连续给药12周,对每周大鼠体质量进行评估,最后1周处死大鼠进行生化指标的测定、进行脏器系数和病理组织学的检查,综合评估其毒性.结果:长期给药后,与完整皮肤空白组比较,各组大鼠体质量差异无统计学意义,血液生化指标
目的:探讨蛋白激酶B(Akt)过表达对毛兰素抑制人膀胱癌细胞5637增殖作用的影响及相关机制.方法:运用慢病毒载体建立5637细胞Akt稳定过表达株,并进行如下分组,以空载体感染5637细胞作为空白组,Akt组,空载体加药组(毛兰素62.5μg·L-1),Akt加药组(毛兰素62.5μg·L-1);采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法测定细胞活性;通过克隆形成实验检测各组5637细胞克隆形成情况;进行流式细胞术检测,评价细胞周期分布情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化(p)-A
脑梗死在脑血管疾病中最为常见,随着社会的老龄化和不良生活习惯,成为严重危害人类健康的重大疾病.西药阿替普酶静脉溶栓作为脑梗死早期溶解血栓,通过静脉溶栓治疗的最佳时机,是血流再通的最有效的治疗方式,目前被广泛应用于医院治疗脑梗死的急救.中医是依据患者的病史资料及临床表现给予辨证治疗,常见不同证型的脑梗死,如有气虚血瘀证应采用益气活血化瘀方;痰瘀阻络证应采用化痰通络方;肝风内动证应采用平肝熄风方;痰蒙清窍证应采用醒神开窍方;肝阳暴亢证应采用平肝潜阳方.
目的:评价吴茱萸中吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素体内外作用的肝损伤,为吴茱萸毒性物质基础研究提供依据.方法:吴茱萸水提物小鼠肝损伤实验,将美国癌症研究所(ICR)小鼠分为吴茱萸水提物高、中、低剂量组(80,60,40 g·kg-1)和空白组,给药24 h后取血测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,取肝脏进行组织病理学检查.吴茱萸碱,吴茱萸次碱,柠檬苦素体外毒性实验,将不同单体成分分别作用于HepG2细胞24 h,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法考察细胞毒性.将雄性I
目的:观察地参多糖(LLP)的体外抗肿瘤活性及机制.方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测LLP(0,5,10,15,20 g·L-1)对A549细胞不同作用时间(24,48,72 h)的增殖抑制作用;采用细胞划痕,transwell实验检测LLP(10,20 g·L-1)作用24,48 h后A549细胞的迁移侵袭能力;碘化丙啶(PI)单染法检测LLP(10,20 g·L-1)对A549细胞周期的影响;异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/PI凋亡试剂盒检测LLP(10,20 g·L-1)诱