【摘 要】
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目的:采用Seahorse细胞能量代谢分析仪,通过缺氧损伤的高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)建立一种线粒体能量代谢评价方法并探究益气解毒方的线粒体保护作用.方法:应用缺氧小室体外构建PC12细胞损伤模型,实验设置空白组,模型组(Model),益气解毒方高、中、低剂量组(25,5,1μ.tmol·L-1;YQ高、中、低)及阳性药曲美他嗪组(TMZ),每组3复孔,实验重复3次.采用建立的能量代谢分析方法对细胞线粒体复合物活性进行检测,筛选最佳给药浓度;随后设置益气解毒方全方及各拆方组,采用Seaho
【机 构】
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中国中医科学院中药研究所,北京100700;安徽中医药大学,合肥230000
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目的:采用Seahorse细胞能量代谢分析仪,通过缺氧损伤的高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)建立一种线粒体能量代谢评价方法并探究益气解毒方的线粒体保护作用.方法:应用缺氧小室体外构建PC12细胞损伤模型,实验设置空白组,模型组(Model),益气解毒方高、中、低剂量组(25,5,1μ.tmol·L-1;YQ高、中、低)及阳性药曲美他嗪组(TMZ),每组3复孔,实验重复3次.采用建立的能量代谢分析方法对细胞线粒体复合物活性进行检测,筛选最佳给药浓度;随后设置益气解毒方全方及各拆方组,采用Seahorse细胞能量代谢分仪检测有氧呼吸和糖酵解功能;根据非线粒体呼吸值,质子漏值,基础呼吸值,最大呼吸值,ATP生成量,可提升呼吸能力检测值,通过主成份分析(PCA)和变量重要性指标(VIP),分析评价益气解毒方不同配伍组对缺氧损伤线粒体有氧呼吸作用效果;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞色素C(Cytochrome C),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达.结果:与其他浓度组比较,FCCP的最佳给药浓度为2μmol·L-1;与模型组比较,5 μmo1·L-1益气解毒方全方能提升线粒体复合物活性(P＜0.05);与模型组比较,益气解毒方全方改善效果较好(P＜0.01);在各拆方组中,人参皂苷和栀子苷配伍效果较好(P＜0.01);VIP分析结果显示,对于线粒体呼吸功能改善,益气解毒方中栀子苷贡献度最大;与模型组比较,益气解毒方中、高剂量组线粒体细胞色素C的渗漏显著减少(P＜0.01),Bax蛋白的表达显著降低(P＜0.01),Bcl-2蛋白的表达明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:建立了一种细胞水平、高通量线粒体能量代谢多指标定量评价方法,证明了益气解毒方全方能够显著改善缺氧损伤后PC12细胞线粒体能量代谢障碍,而发挥这一作用的机制可能与线粒体凋亡保护相关.
其他文献
目的:观察当归补血汤对糖尿病肾病(DKD)大鼠足细胞焦亡的影响,探讨其防治DKD及足细胞焦亡的可能作用机制.方法:将50只雄性SD大鼠随机分为造模组42只和正常组8只,造模组大鼠高糖高脂饮食6周结合链脲佐菌素(STZ)35 mg·kg-1一次性腹腔注射制备2型糖尿病模型.造模成功后随机分为模型组、当归补血汤低剂量(0.72 g·kg-1)组、当归补血汤高剂量(1.44 g·kg-1)组、厄贝沙坦(0.017 g·kg-1)组进行灌胃,正常组及模型组给予等体积生理盐水灌胃,每日1次,连续干预20周.给药期间
目的:探讨归芪白术方联合奥沙利铂对胃癌荷瘤小鼠表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)表达及血管生成的影响.方法:昆明种小鼠进行实验并建立胃癌荷瘤模型,造模成功后将小鼠随机分成6组:空白组、模型组、奥沙利铂组(10mg·kg-1)、联合高、中、低剂量组(奥沙利铂10mg·kg-1联合归芪白术方17.68、8.84、4.42g·kg-1);末次给药后,取移植瘤,计算抑瘤率;苏木素-伊红(HE)染色观察瘤组织形态学变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清表皮生长因子(EGF)
目的:观察六味地黄汤对糖尿病抑郁(DD)大鼠抑郁样行为的影响,并探讨其作用机制.方法:50只SPF级雄性SD大鼠采用高脂饮食喂养加尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)的方法制备糖尿病模型,随后糖尿病大鼠予28d慢性不可预测的轻度应激(CUMS)的方法建立DD模型.随机分为5组,模型组,氟西汀组(10 mg·kg-1·d-1),六味地黄汤低、中、高剂量组(3.375,6.75,13.5 g·kg-1·d-1),每组10只.另取正常组10只,生理盐水灌胃.连续灌胃4周后,悬尾实验和旷场实验用于评估大鼠的抑郁表
目的:观察当归补血汤对糖尿病肾病(DKD)大鼠足细胞损伤及受体相互作用蛋白激酶1/受体相互作用蛋白激酶3/混合系激酶区域样蛋白(RIPK1/RIPK3/MLKL)信号通路的影响,探讨其治疗DKD的可能作用机制.方法:50只SD大鼠随机选取8只设为正常组,其余大鼠6周高糖高脂饮食结合一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)0.035g·kg-1制备2型糖尿病大鼠模型.模型制备成功后随机分为模型组,当归补血汤高、低剂量(1.44,0.72 g·kg-1)组,厄贝沙坦(0.017 g·kg-1)组.药物干预20周后检
目的:探讨血必净注射液(XBJ)对牛磺胆酸钠(Na-Tc)诱导重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型的治疗作用.方法:将40只大鼠随机均分为5组,分别为假手术组、SAP模型组、XBJ低、中、高剂量组(4、8、12mL·kg·d-1).以胆胰管内逆行注射Na-Tc(1 mL·kg-1)制备SAP模型,XBJ在造模前3d和造模后0.5h进行腹腔注射给药.测量大鼠腹水量和胰腺组织湿质量比;采用苏木素-伊红(HE)染色观察胰腺组织病理变化;采用免疫组化检测胰腺组织甲酰肽受体1(FPR1)和核苷酸结合寡聚化结构域样受体3
目的:研究加味小陷胸汤对人胃癌MGC803细胞上皮间质转化(EMT)抑制作用及与分泌型糖蛋白Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)通路关系.方法:采用人胃癌MGC803细胞悬液种植法构建BALB/c裸鼠皮下异位移植性肿瘤动物模型.造模成功后随机分为模型组、加味小陷胸汤低、中、高剂量组(16.0,32.0,64.0g·kg-1),卡培他滨组(400 mg· kg-1),每组8只,灌胃给药,每日1次,连续给药28d,其中卡培他滨组给2周停l周.观察裸鼠一般状态、体质量,测量移植瘤大小,处死后称质量
随着科技水平的进步,人们的交流问题的方式也越来越多元化.随着社会经济的发展,生活工作节奏的加快,这是促进或阻碍青年人发展的一个重要因素.尤其是大学生刚刚进入社会,而产生的心理压力和心理不适应越来越大.抑郁症是导致认知障碍方面的疾病,促使大学生抑郁症发病率明显上升,面临极高的复发风险.抑郁症特点是心情持续的低落,开始无缘无故的流泪,闷闷不乐到悲痛欲绝,部分患者还会出现轻生行为,甚至到自杀,一部分极端的患者会产生伤害他人的行为.大学生患抑郁症心理咨询,主要采用认知方面的疗法来改变患者的认知模式,从而消除自卑的
目的:基于保肺康颗粒对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响,探讨其对于肺纤维化大鼠模型的干预作用.方法:将50只健康大鼠适应性喂养1周后,随机选取8只作为空白组,其余42只大鼠采用常规麻醉后气管内注入硫酸博莱霉素溶液(5 mg·kg-1)的方法制备肺纤维化模型,空白组以相同操作方法注入等量生理盐水.造模后第7天,将剩余33只存活的博莱霉素造模大鼠随机剔除1只,其余32只随机分为模型组、醋酸泼尼松组、保肺康低、高剂量组,每组8只.保肺康高、低剂量组分别给予保肺康颗粒27.18,13.59
目的:研究蚊母草提取物(EVP)的抗乳腺癌破骨性骨转移作用.方法:采用左心室注射肿瘤细胞法建立裸鼠骨转移模型,通过巢式聚合酶链式反应(PCR)检测裸鼠骨髓组织中人细胞角蛋白-19(Ck-19)基因表达量确定肿瘤细胞的骨转移程度及EVP的抑制作用;采用多核细胞计数法及组织蛋白酶K(Cathepsin K)分泌量检测法,确定小鼠破骨细胞前体骨髓巨噬细胞(BMMs)的活性,并观察EVP(40、80、160g·L-1)的抑制作用;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)观察EVP对BMMs细胞内核转录因子-
目的:应用网状Meta分析方法比较与评价5个经典名方治疗儿童支气管哮喘(BA)及咳嗽变异性哮喘(CVA)急性发作的临床疗效,并分别进一步比较与评价其中不同方剂治疗寒性哮喘或热性哮喘两大类证型的临床疗效.方法:运用计算机检索并筛选维普数据库(VIP),中国知网(CNKI)与万方(Wanfang Data)等数据库中关于5个经典名方(三子养亲汤、麻杏石甘汤、射干麻黄汤、小青龙汤、定喘汤)治疗哮喘急性发作的随机对照试验(RCT),时间区间段为创库以来至2021年8月15日.对纳入文献进行评估和筛选,并完成资料提