实时荧光定量RT-PCR检测乳腺癌VEGF mRNA的表达

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目的建立实时荧光定量逆转录-多聚酶链反应(real-timequantitative,RT-PCR)检测乳腺癌患者肿瘤组织VEGFmRNA表达的方法,并验证其与免疫组织化学LSAB方法检测VEGF蛋白表达的相关性。方法提取组织总RNA,逆转录成mRNA,采用实时荧光定量RT-PCR检测44例乳腺浸润性导管癌、25例癌旁正常小叶组织、13例乳腺良性疾病组织中VEGFmRNA表达;采用免疫组织化学LSAB法和彩色图像病理分析系统半定量检测其VEGF蛋白表达。结果乳腺癌组织中VEGFmRNA表达水平显著高于癌旁和良性病组织(P<0.001),而后两者之间无明显差异(P>0.05);VEGF蛋白表达在癌组织,癌旁和良性病组中的分布特点与VEGFmRNA完全一致。结论本研究所建立的用于检测人乳腺组织VEGFmRNA表达的实时荧光定量RT-PCR方法,是一种快速有效、灵敏度高、特异性好的定量检测方法,与免疫组化LSAB方法检测的VEGF蛋白表达具有良好相关性,在乳腺癌的早期诊断和良恶性鉴别诊断中具有重要的参考价值。
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