【摘 要】
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目的研究鬼臼毒素对体外培养大鼠附睾上皮细胞基因表达的影响。方法离体培养大鼠附睾上皮细胞给予溶剂(DMSO)和鬼臼毒素0.01μg·mL-1,作用48 h后分别抽提RNA,纯化定量质检后
【机 构】
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上海市计划生育科学研究所,浙江大学,中国科学院理化技术研究所
【基金项目】
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“十二五”国家科技支撑计划(2012 BAI31B08);国家自然科学基金(81100463)
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目的研究鬼臼毒素对体外培养大鼠附睾上皮细胞基因表达的影响。方法离体培养大鼠附睾上皮细胞给予溶剂(DMSO)和鬼臼毒素0.01μg·mL-1,作用48 h后分别抽提RNA,纯化定量质检后制备荧光标记探针标记样品cD NA,将纯化后的c DNA样品片段化后与芯片杂交,检测芯片并记录结果。结果鬼臼毒素组细胞与空白对照组相比,差异倍数在5倍以上的有137个基因,其中73个基因上调,64个基因下调;差异倍数在10倍以上的有40个,包括26个上调基因(U2SURP,DANJB7,ARHGAP15,TEMEM47,CCL3,MMP9,CSF3,IL23A,CXCL2,MMP13,CSF2,CXCL3,MMP10,CXCL5,SCIN,LOC500846,OLR540,PLA2G2A,CXC3CLL,IL1B,LOC363060,DCHS2,CCL20,RNASE10,LOC360228,TNF-A)和14个下调基因(RAB44,KRT5,ADAMTSL2,LOC685767,LOC688842,RGD1564513,POP1,KCNJ10,POLR3A,CNTROB,FAM109A,ORL578,COL1LA2,TAS2R71)。两组差异表达基因Pathway富集功能分析显示,显著上调基因主要涉及细胞因子受体间相互作用(cytokine-cytokine receptor interaction)、肿瘤坏死因子信号通路、NF-kappa B信号通路、趋化因子信号通路、凋亡通路及风湿性关节炎通路;显著下调基因主要涉及神经刺激性配体受体通路和嗅觉传到通路等。差异基因最集中的通路是细胞因子间相互作用及细胞凋亡。结论鬼臼毒素主要通过两条途径影响大鼠附睾上皮细胞生长,分别是诱导凋亡和引发炎症反应。
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