小桐子磷脂二酰甘油酰基转移酶(JcPDATl)cDNA的克隆与功能鉴定

来源 :中国油料作物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:baby_xiaojuan
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使用简并PCR结合RACE技术从能源植物小桐子种子中克隆了一个PDAT基因的cDNA全长,命名为JcPDAT1(GenBank登陆号为HQ827796).JcPDA T1全长2 869bp,包含一个长为2 013bp的开放阅读框,编码670个氨基酸.多序列比对和进化分析表明该基因编码蛋白与其他植物PDAT高度同源,具有典型的PDAT结构域.Realtime PCR结果表明JcPDAT1在种子、叶和根里面都有表达,且在种子发育过程中大量表达.酵母互补实验证实该基因编码蛋白具有PDAT酶活性.在与酿酒酵母突变体H1246α的互补实验中发现,TLC层析(薄层层析法)和尼罗红染色结果都显示JcPDAT1的表达使H1246α恢复合成TAG,说明JcPDAT1具有PDAT的功能活性.
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