【摘 要】
：
目的 建立抗原微阵列技术检测多种病原体抗体.方法 将病原体的基因工程抗原,以电脑操纵的机械手将其点在赖氨酸修饰的玻片上,制备抗原微阵列,与血清反应后随之与Cy3标记的二抗反应,用激光共聚焦扫描仪扫描玻片,检测血清中相应病原体的IgG,并进行了灵敏度和重复性的检测.结果 5种抗原的最低检测限度为HSV1-gG 1.56 μg/ml,HSV2-gG3.125 μg/ml,CMV-p150 1.56 μ
【机 构】
：
山东省医药生物技术研究中心,国家卫生部生物技术药物重点实验室,山东省现代医用药物与技术重点实验室,济南,250062，济南市立四院,济南,250062,济南市妇幼保健院,济南,250062,山东省医药
论文部分内容阅读
目的 建立抗原微阵列技术检测多种病原体抗体.方法 将病原体的基因工程抗原,以电脑操纵的机械手将其点在赖氨酸修饰的玻片上,制备抗原微阵列,与血清反应后随之与Cy3标记的二抗反应,用激光共聚焦扫描仪扫描玻片,检测血清中相应病原体的IgG,并进行了灵敏度和重复性的检测.结果 5种抗原的最低检测限度为HSV1-gG 1.56 μg/ml,HSV2-gG3.125 μg/ml,CMV-p150 1.56 μg/ml,RV-E1E2 3.125 μg/ml,MT-LAM 31.36 μg/ml;抗原微阵列与ELISA检测的结果相比有较高的符合率;检测IgG和IgM的灵敏度分别为50 pg、10 pg;不同批次2张玻片间总体变异系数为IgG6.52,IgM 18.89.结论 抗原微阵列可用于平行检测血液中病原体特异性抗体。
其他文献
对COBAS AMPLICOR系统、多重PCR和巢式PCR扩增沙眼衣原体(CT)质粒和/或外膜蛋白(omp1)VD2基因,并以反向线点杂交技术(Reverse line blot hybridization assay,RLB)进行CT血清学分型对CT检测方法进行了比较。
众多资料显示急性呼吸道感染中90%～95%是由病毒感染所致,其中多种病毒具有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急等特点,并且近来新的致病性病毒还在不断地被发现,如人类偏肺病毒、SARS病毒、高致病性禽流感病毒等,给临床疾病诊断和治疗造成极大的困难。
目的 了解北京地区人Boca病毒(human Bocavirus,HBoV)的基因组编码特征,并对其基因组编码的非结构蛋白NS1、核蛋白NP-1以及病毒外壳蛋白VP1及VP2的二级结构等特性进行预测分析.方法 从已证明为HBoV阳性的2份临床标本BJ3064、BJ3722中应用针对NS1、NP-1、VP1、VP2基因组3'末端的引物对经PCR扩增得到预期片段,将扩增产物直接测序后得到基因组序列;运
目的 探讨分子佐剂hC3d3与hCGβ的融合蛋白hCGβ-hC3d3对人外周血单个核细胞（PBMC）中的B细胞与T细胞表面协同刺激分子表达及对hCGβ抗原反应性的影响。方法从人肝细胞cDNA文库克隆hC3d基因片段；构建pCI-gs-signal-6His-hCGβ及pCI-gs-signal-6His-hCGβ-hC3d3真核表达质粒，表达和纯化重组蛋白抗原hCGβ及hCGβ-hC3d3融合蛋白
目的 研究人食管癌是否存在螺杆菌感染及其与NF-κB p65蛋白的关系,从而探讨在人食管癌发生中的意义.方法 随机收集食管癌标本40例和正常食管标本10例,采用聚合酶链反应(PCR)扩增螺杆菌16S rRNA,随机选4例测序及同源比较.阳性者再扩增幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)的特异基因相对分子质量(Mr)26×103的种特异性抗原和相关功能基因(CagA,VacA).并采用免疫组化法检测食
人禽流感病是由甲型禽流感病毒(AIV)某些亚型的毒株感染人引起的急性呼吸道传染病.人高致病性禽流感病的潜伏期一般为1～3 d,起病急,早期表现类似普通流感.主要症状为发热,伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和全身不适.2006年2月22号,广州市一家医院发现1名患者出现"流感样"症状,表现为发热、咳嗽和白细胞数降低等发热肺炎症状,3月3日因治疗无效死亡。
军团病(Legionnaires'disease)是由军团菌感染引起的以肺炎为主要症状的急性呼吸道传染病,嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,Lp)是引起军团病的主要菌群.目前研究发现军团菌广泛存在于自然界的土壤和各种水环境中,中央空调冷却塔是军团菌主要的传染源,近30年来军团病大的暴发多与中央空调冷却塔被军团菌污染有关。
1999年,Yá(n)ez等[1]首次从抗磷脂综合征患者的血液、口腔黏膜和支气管标本中分离到穿透支原体(Mpe,HF1～3),我们曾从肿瘤患者的血液与肿瘤组织中分离到Mpe[2],提示Mpe可从非HIV感染人群分离.近年来的研究表明,诸如肺炎支原体(Mp)、解脲脲原体(Uu)、人型支原体(Mh)、Mpe、发酵支原体(Mf)等人类致病性支原体的感染与多种自身免疫病相关[3].IgA肾病是一组多病因引
目的 白细胞介素5(IL-5)作为参与嗜酸粒细胞成熟、分化过程的最主要因子,其作用通过特异性受体IL-5Rα介导.本文以支气管上皮细胞株为研究对象,证实该上皮细胞株在炎症因子的刺激下可以表达IL-5Rα.方法 通过促炎症因子TNF-α和TH2型细胞因子IL-4、IL-5、IL-13以及白三烯成分之一的LTCA(白三烯C4)对细胞进行单独或协同刺激,以RT-PCR方法、流式细胞检测技术评价上皮细胞对
目的 制备加载白血病抗原肽PR1的HLA-A＊0201四聚体。方法构建HLA-A＊0201-BSP和β2-微球蛋白（β2M）原核表达载体，进行目的蛋白表达、纯化。在体外将PR1（VLQELNVIV）与纯化的HLA-A＊0201-BSP、β2M通过稀释复性折叠成HLA-A＊0201-PR1复合物。利用BirA酶进行生物素标记。再经阴离子交换纯化得到生物素化的HLA-A＊0201-PR1复合物单体。此