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目的
探讨氯喹对肝细胞癌Huh7细胞死亡受体5(DR5)表达及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导的细胞增殖和凋亡的影响。
方法Huh7细胞分为对照组(1∶1 000二甲基亚砜)、TRAIL组(50 μg/L)、氯喹组(10 μmol/L)及TRAIL+氯喹组(TRAIL 50 μg/L+氯喹10 μmol/L),四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞的增殖活性;免疫荧光检测各组细胞DR5蛋白的表达情况;4',6'-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)核染色观察细胞凋亡,并用蛋白质印迹法检测细胞凋亡指标切割的聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶(cleaved PARP)的表达情况。
结果TRAIL处理可降低Huh7细胞增殖活性,以对照组细胞活力为对照时,氯喹组、TRAIL组及TRAIL+氯喹组细胞增殖抑制率分别为(89±8)%、(53±10)%及(27±7)%;与TRAIL组相比,TRAIL+氯喹组细胞增殖活力下降(t=3.922,P=0.017)。氯喹组上调细胞DR5的表达,TRAIL+氯喹组可活化细胞凋亡信号,TRAIL组和TRAIL+氯喹组细胞的凋亡率分别为(10.0±2.3)%和(20.4±4.0)%,两组比较差异有统计学意义(t=3.894,P=0.018)。
结论氯喹可通过上调Huh7细胞DR5的表达,增强细胞对TRAIL作用的敏感性。