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根据猪乳铁蛋白N端基因序列及表达载体质粒的基因融合特点,设计一对引物,以泌乳3日龄母猪乳腺组织RNA为模板,进行RT—PCR,获得含有猪乳铁蛋白基因N端1077bp目的片段,将其与表达裁体质粒pPG612.1进行连接,通过转化进入宿主菌JM109细胞内,通过质粒提取、PCR鉴定、酶切鉴定和序列测定分析,表明猪乳铁蛋白N端PLF、基因已成功插入到表达裁体质粒中,获得了猪乳铁蛋白干酪乳杆菌表达载体质粒pPG612一PLFNo将获得的重组质粒再分别电转化入干酪乳杆菌ATCC393、植物乳杆菌KLDSl.0344